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4-Nitrophenylphosphat Dinatriumsalz Hexahydrat, 2.5 g

≥99 %, p.a.
VE
Verp.
pNPP, p-Nitrophenylphosphat
Summenformel C6H4NNa2O6P · 6 H2O
Molare Masse (M) 371,12 g/mol
Schmelzpunkt (F) 300 °C
Lagertemp.: +4 °C
WGK 1
CAS Nr. [4264-83-9]
EG-Nr. 224-246-5

Substrat für die alkalische Phosphatase, insbesondere für ELISA.
Anwendungshinweise: Arbeitslösung: 1 mg/ml in Diethanolamin-Substratpuffer (10 mM Diethanolamin, 0,5 mM MgCl2, pH 9,5). Zur Endpunkt-Analyse kann die Reaktion mittels 2–3 M NaOH gestoppt werden.

Substrat der Alkalischen Phosphatase zur Verwendung in ELISA Ansätzen. Beim Umsatz des pNPP entsteht ...
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Wenn Sie auch im Analysenzertifikat und den Anwendungsbeispielen keine Antwort auf Ihre Frage finden können, nehmen Sie gerne Kontakt zu uns auf!
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4-Nitrophenylphosphat Dinatriumsalz Hexahydrat ≥99 %, p.a.

Substrat der Alkalischen Phosphatase zur Verwendung in ELISA Ansätzen. Beim Umsatz des pNPP entsteht ein gelbes, lösliches Produkt, das bei 405 nm photometrisch detektiert werden kann.



Technische Informationen
Enzym Alkalische Phosphatase  
Gehalt (HPLC) ≥99 %  
Nachweis Farbe (gelb)  
Signalprodukt löslich (ELISA, Aktivitätsassay)  
4-Nitrophenylphosphat Dinatriumsalz Hexahydrat
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  1. Zwischensumme:  0.00
Bestell Nr. VE Verp. Preis Menge
4165.1 2,5 g Glas 14,90 €
4165.7 100 g Glas 165,00 €
4165.9 25 g Glas 60,50 €
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Allgemeine Informationen

Versuchsprotokoll zur Anwendung von BCIP-p-Toluidinsalz/NBT bei Immunoblot-Verfahren:

Stammlösungen (Stabilität bei +4 °C ein Jahr):
0,5 g NBT in 10 ml 70 % Dimethylformamid.
0,5 g BCIP-p-Toluidinsalz in 10 ml 100 % Dimethylformamid.
Inkubationspuffer für die Alkalische Phosphatase:
100 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 100 mM TRIS (pH 9,5).
Frische Substratlösung: 66 μl der NBT-Stammlösung + 10 ml des Inkubationspuffers, gut mischen, 33 μl BCIP Stammlösung hinzufügen. Innerhalb einer Stunde verbrauchen.
Blot-Entwicklung: Ca. 10 ml der Substratlösung pro 15 x 15 cm2 Membranoberfläche. Entwicklung bei Raumtemperatur, bis Banden sichtbar werden (ca. 30 min).
Reaktions-Stopp: Mit PBS/20 mM EDTA spülen.

Ansatz für den Nachweis der Peroxidase-Aktivität (Immunoassay):

1 mg TMB in 0,1 ml Dimethylsulfoxid (Best.-Nr. 4720) auflösen. 9,9 ml einer 0,1 M Natriumacetat-Lösung (pH 6,0) (Pulver: Best.-Nr. 6779) hinzufügen, filtern und H2O2 (Best.-Nr. 8070) (Endkonzentration 0,01 %) zugeben.

Immer frisch ansetzen!

Inkubation 10–30 min bei Raumtemperatur (ca. 50 μl pro Mikrotiterwell; anschließend Zugabe von 50 μl 1 M H2SO4, Best.-Nr. X873, pro Well).
Photometrische Quantifizierung bei 450 nm.

Literaturhinweis: Bos E.S. et al. (1981) J. Immunoassay 2, (3/4), 187.

Analysenzertifikate

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Garantieanalyse

Gehalt (HPLC)≥99,0 %
Lösung (5 % in H2O)klar, farblos bis gelb
Freies 4-Nitrophenol≤0,01 %

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