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4-Nitrophényl phosphate, sel disodique hexahydraté, 2.5 g

≥99 %, p.a.
Cdt.
Emb.
pNPP, p-Nitrophényl phosphate
Formule brute C6H4NNa2O6P · 6 H2O
Masse moléculaire (M) 371,12 g/mol
Point de fusion 300 °C
Temp. de stockage : +4 °C
WGK 1
Nr. CAS[4264-83-9]
EG-Nr. 224-246-5

Substrat de la phosphatase alcaline, notamment pour l’ELISA.
Conseil d’utilisation : solution de travail : 1 mg/ml dans un tampon de substrat diéthanolamine (10 mM de diéthanolamine, 0,5 mM de MgCl2, pH 9,5). Afin d’analyser la fin de réaction, celle-ci peut être stoppée par du NaOH 2-3 M.

Substrat de la phosphatase alcaline pour une utilisation en ELISA. Lors de la transformation du pNPP ...
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21,70 CHF/cdt. 

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4-Nitrophényl phosphate, sel disodique hexahydraté ≥99 %, p.a.

Substrat de la phosphatase alcaline pour une utilisation en ELISA. Lors de la transformation du pNPP, il y a formation d’un produit soluble jaune, qui peut être détecté par photométrie à 405 nm.



Informations techniques
Enzyme Phosphatase alcaline 
Mise en évidence Couleur (jaune) 
Produit signal soluble (ELISA, test d'activité) 
4-Nitrophényl phosphate, sel disodique hexahydraté
Quantité sélectionnée :   0
  1. Somme intermédiaire :  0.00
Réf. Cdt. Emb. Prix Quantité
4165.1 2,5 g verre 21,70 CHF
4165.7 100 g verre 239,30 CHF
4165.9 25 g verre 88,10 CHF
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Téléchargements

Informations générales

Protocole d’essai pour l’utilisation du BCIP sel de p-toluidine/NBT lors des procédures dimmunotransfert :

Solutions mères (stable un an, si conservée à 4 °C) :
0,5 g de NBT dans 10 ml de diméthylformamide à 70 %.
0,5 g de BCIP-sel de p-toluidine dans 10 ml de diméthylformamide à 100 %.
Tampon d’incubation pour la phosphatase alcaline :
100 mM de NaCl, 5 mM de MgCl2, 100 mM de TRIS (pH 9,5).
Solution de substrat fraîche : 66 μl de solution mère NBT + 10 ml de tampon d’incubation, bien mélanger, ajouter 33 μl de solution mère BCIP. Utiliser en l’espace d'une heure.
Développement de blot : Env. 10 ml de solution de substrat par surface de membrane de 15 x 15 cm2. Développement à température ambiante, jusqu’à ce que les bandes deviennent visibles (30 min. environ).
Arrêt de réaction : rincer avec PBS/EDTA 20 mM.


Préparation pour la mise en évidence de l'activité de la peroxydase (immunodosage) :

Dissoudre 1 mg de TMB dans 0,1 ml de diméthylsulfoxyde (réf. 4720). Ajouter 9,9 ml d’une solution d’acétate de sodium 0,1 M (pH 6,0) (poudre : réf. 6779), filtrer et ajouter H2O2 (réf. 8070) (concentration finale 0,01 %).

Utiliser toujours des solutions de travail fraîchement préparées !

Incubation pendant 10 à 30 minutes à température ambiante (env. 50 μl par puits de microtitration ; ajouter ensuite 50 μl de H2SO4 1 M, réf. X873 par puits).
Quantification photométrique à 450 nm.

Référence bibliographique : Bos E.S. et al. (1981) J. Immunoassay 2, (3/4), 187.


Certificats d'analyse

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Les certificats d'analyse suivants ont été trouvés :

Analyse garantie

Teneur (HPLC)≥99,0 %  
Solution (5 % dans H2O)limpide, incolore à jaune  
4-Nitrophénol libre≤0,01 %  

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