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Bleu de nitro tétrazolium chlorure, 1 g

≥98 %, p.a.
Cdt.
Emb.
Nitro-BT, NBT
Formule brute C40H30Cl2N10O6
Masse moléculaire (M) 817,65 g/mol
Point de fusion 189 °C
Temp. de stockage : +4 °C
WGK 1
Nr. CAS[298-83-9]
EG-Nr. 206-067-4

Conseil d’utilisation : Voir aussi le protocole sur l’utilisation de BCIP/NBT en immunoblotting. À protéger de la lumière et l’humidité.

À utiliser en combinaison avec le sel de toluidine BCIP (X-phosphate) pour la mise en évidence de l’ ...
Données du produit
Spécification

111,90 CHF/cdt. 

TVA en sus. | 1 g par cdt.

Réf. 4421.3

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Bleu de nitro tétrazolium chlorure ≥98 %, p.a.

À utiliser en combinaison avec le sel de toluidine BCIP (X-phosphate) pour la mise en évidence de l’activité de la phosphatase alcaline par formation d’un précipité indigo. Amplificateur de coloration pour les colorations médiées par la phosphatase alcaline. Les ions H+ libérés lors de la dimérisation de X-phos cétonisé réduisent le NBT en diformazan pourpre. Les deux colorants précipitent à proximité de la phosphatase et colorent l'endroit précis en violet foncé.



Informations techniques
Application Western, in situ, Histochimie 
Enzyme Phosphatase alcaline 
Mise en évidence Couleur (marron-violet) 
Produit signal Précipiter (Blot) 
Bleu de nitro tétrazolium chlorure
Quantité sélectionnée :   0
  1. Somme intermédiaire :  0.00
Réf. Cdt. Emb. Prix Quantité
4421.1 100 mg verre 23,70 CHF
4421.2 500 mg verre 60,90 CHF
4421.3 1 g verre 111,90 CHF
4421.4 5 g verre 413,00 CHF
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Disponible à court terme
Non disponible
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Informations générales

Protocole d’essai pour l’utilisation du BCIP sel de p-toluidine/NBT lors des procédures dimmunotransfert :

Solutions mères (stable un an, si conservée à 4 °C) :
0,5 g de NBT dans 10 ml de diméthylformamide à 70 %.
0,5 g de BCIP-sel de p-toluidine dans 10 ml de diméthylformamide à 100 %.
Tampon d’incubation pour la phosphatase alcaline :
100 mM de NaCl, 5 mM de MgCl2, 100 mM de TRIS (pH 9,5).
Solution de substrat fraîche : 66 μl de solution mère NBT + 10 ml de tampon d’incubation, bien mélanger, ajouter 33 μl de solution mère BCIP. Utiliser en l’espace d'une heure.
Développement de blot : Env. 10 ml de solution de substrat par surface de membrane de 15 x 15 cm2. Développement à température ambiante, jusqu’à ce que les bandes deviennent visibles (30 min. environ).
Arrêt de réaction : rincer avec PBS/EDTA 20 mM.


Préparation pour la mise en évidence de l'activité de la peroxydase (immunodosage) :

Dissoudre 1 mg de TMB dans 0,1 ml de diméthylsulfoxyde (réf. 4720). Ajouter 9,9 ml d’une solution d’acétate de sodium 0,1 M (pH 6,0) (poudre : réf. 6779), filtrer et ajouter H2O2 (réf. 8070) (concentration finale 0,01 %).

Utiliser toujours des solutions de travail fraîchement préparées !

Incubation pendant 10 à 30 minutes à température ambiante (env. 50 μl par puits de microtitration ; ajouter ensuite 50 μl de H2SO4 1 M, réf. X873 par puits).
Quantification photométrique à 450 nm.

Référence bibliographique : Bos E.S. et al. (1981) J. Immunoassay 2, (3/4), 187.


Certificats d'analyse

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Les certificats d'analyse suivants ont été trouvés :

Spécification

Teneur (titration anhydrique)≥98 %  
Eau (KF)≤5,0 %  

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