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ROTI®Lumin ultra, 2 x 20 ml en flacon vaporisateur

prête à l’emploi, pour les protéines et la cytoimmunochimie
Icon_Eisstern Les produits ainsi labellisés sont des produits particulièrement sensibles à la température et sont expédiés dans des boîtes isothermes spéciales avec éléments réfrigérants ou de la carboglace.
Icon_ready-to-use Produits et réactifs prêts à l’emploi
Cdt.
Emb.
Cdt.
Substrat HRP
Temp. de stockage : +4 °C
Temp. de transport: réfrigérée

Substrat de chimiluminescence extrêmement efficace pour réaliser des détections en Western Blot par marquage HRP.
2 x 100 ml sont suffisants pour env. 10 000 cm2 de membrane (env. 150 transferts de mini-gel).

Spécification

311,50 CHF/cdt. 

TVA en sus. | 1 kit par cdt.

Réf. 3734.1

En stock
Livraison gratuite à partir de 200 CHF
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à partir de 6 cdt. 295,92 CHF/cdt.
à partir de 24 cdt. 280,35 CHF/cdt.
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Données du produit


  • Très simple d’utilisation
  • Pour pulvériser ou pipetter
  • Force de signal exceptionnelle pour la détection dans la partie basse du femtogramme
  • Parfaitement adapté pour tous les temps d’exposition
  • Convient pour les membranes NC, optimal pour les membranes PVDF.

Nouveau substrat Western blot, nettement renforcé, à base de luminol pour la mise en évidence, par chimiluminescence, de la peroxydase de raifort (HRP) sur les membranes. La composition très optimisée permet d’obtenir une force de signal particulièrement élevée pendant plus de 30 minutes, avec une nouvelle hausse 10 à 15 minutes après l’application. ROTI®Lumin ultra est ainsi, avec très peu d'autres réactifs, le substrat de chimiluminescence de HRP le plus sensible actuellement disponible.

L’astucieux vaporisateur procure un gain de temps en évitant l’étape de préparation d’un mélange - il suffit de vaporiser sur les membranes la solution substrat 1 et la solution amplificatrice 2. La technique de vaporisation garantit une répartition fine et homogène du substrat sur la surface membranaire, en évitant les artefacts induits par une répartition irrégulière du substrat pipetté. L’excellente force du signal permet de détecter les protéines dans le domaine du femtogramme à un chiffre et de réduire nettement la concentration d'anticorps coûteux.

  • Vaporisation de la membrane avec la solution 1
  • Immédiatement suivie de la vaporisation de la solution 2
  • Incubation env. 1 min. (renfermer la membrane dans un film, etc.)
  • Exposition

en présence de peroxyde d’hydrogène, ROTI®Lumin est converti par l'HRP en un dianion excité. Lors du retour du dianion à son état fondamental, il y a émission de lumière. L'émission lumineuse de ROTI®Lumin atteint le maximum en 5 minutes et reste à ce plateau maximal pendant env. 1 à 2 heures.



ROTI®Lumin ultra prête à l’emploi, pour les protéines et la cytoimmunochimie
Conseils d’utilisation

pour un mini-blot d'une taille de 7 × 8 cm, 3 à 4 coups de vaporisateur sont nécessaires.
Si des protocoles existants do vent être utilisés, les flacons vaporisateurs peuvent aussi être simplement dévissés et les solutions peuvent être pipettées.
Pour les temps d’exposition très courts, nous recommandons d'utiliser ROTI®Lumin ultra.

3692_Diagramm_LichtemissionB
Figure :
sensibilité relative des ROTI®Lumins. Mesure de l’émission lumineuse relative après la réaction ECL moyennant HRP dissoute (50 fg).
Compétiteur P : produit concurrent pour le domaine du femtogramme.
3692_Diagramm_Lichtemission30min
Figure :
déroulement typique de la luminescence du groupe ROTI®Lumin: 0-30 min après mélange et vaporisation. Compétiteur P : produit concurrent pour le domaine du femtogramme.

Le kit contient

20 ml (100 ml) de solution 1 (réf. 3990) et de 20 ml (100 ml) de solution 2 (réf. 3991) en vaporisateurs.
Les composants unitaires de ce kit ne peuvent pas être achetés séparément.

3734_RotiLuminUltra_Sensitivitaet
Figure :
sensibilité exceptionnelle de ROTI®Lumin ultra après un temps d'exposition très court (10 secondes). Mise en évidence de 2 µl d’un complexe HRP, série de dilution 1:1 à 1:10.

a/A : ROTI®Lumin ultra ; b/B : produit concurrent pour le domaine du femtogramme.

a/b : temps d'exposition 10 sec., A/B : temps d'exposition 5 min.
3692_Diagramm_Lichtemission5min
Figure :
déroulement typique de la luminescence du groupe ROTI®Lumin : 0-5 min. après mélange et vaporisation. Compétiteur P : produit concurrent pour le domaine du femtogramme.

RotiLumine_Sensitivitaet
Figure : Sensibilité de la ROTI®Lumine.
la sensibilité de ROTI®Lumin ultra se situe dans la partie basse du domaine du femtogramme. Mise en évidence d'un anticorps polyclonal (de g. à d. 4 pg, 400 fg, 40 fg, 4 fg) sur ROTI®PVDF (réf. T830.1). Mise en évidence dans le PBST moyennant un anticorps anti-lapin couplé HRP (1:2000).
a/A: ROTI®Lumin ultra ; b/B: ROTI®Lumin plus ; c/C: ROTI®Lumin ; d/D: produit concurrent pour le domaine du femtogramme. a/b/c/d : temps d'exposition 10 secondes, A/B/C/D : temps d'exposition de 1 minute.


Informations techniques
Enzyme Peroxydase du raifort 
Mise en évidence chimiluminescent 
Produit signal Précipiter (Blot) 
ROTI®Lumin ultra
Quantité sélectionnée :   0
  1. Somme intermédiaire :  0.00
Réf. Cdt. Emb. Cdt. Prix Quantité
3734.1 1 kit plastique 2 x 20 ml en flacon vaporisateur 311,50 CHF
En stock
Disponible à court terme
Non disponible
Date de livraison inconnue à l'heure actuelle
Quantité sélectionnée :   0
  1. Somme intermédiaire :  0.00

Téléchargements

Informations générales

Protocole d’essai pour l’utilisation du BCIP sel de p-toluidine/NBT lors des procédures dimmunotransfert :

Solutions mères (stable un an, si conservée à 4 °C) :
0,5 g de NBT dans 10 ml de diméthylformamide à 70 %.
0,5 g de BCIP-sel de p-toluidine dans 10 ml de diméthylformamide à 100 %.
Tampon d’incubation pour la phosphatase alcaline :
100 mM de NaCl, 5 mM de MgCl2, 100 mM de TRIS (pH 9,5).
Solution de substrat fraîche : 66 μl de solution mère NBT + 10 ml de tampon d’incubation, bien mélanger, ajouter 33 μl de solution mère BCIP. Utiliser en l’espace d'une heure.
Développement de blot : Env. 10 ml de solution de substrat par surface de membrane de 15 x 15 cm2. Développement à température ambiante, jusqu’à ce que les bandes deviennent visibles (30 min. environ).
Arrêt de réaction : rincer avec PBS/EDTA 20 mM.


Préparation pour la mise en évidence de l'activité de la peroxydase (immunodosage) :

Dissoudre 1 mg de TMB dans 0,1 ml de diméthylsulfoxyde (réf. 4720). Ajouter 9,9 ml d’une solution d’acétate de sodium 0,1 M (pH 6,0) (poudre : réf. 6779), filtrer et ajouter H2O2 (réf. 8070) (concentration finale 0,01 %).

Utiliser toujours des solutions de travail fraîchement préparées !

Incubation pendant 10 à 30 minutes à température ambiante (env. 50 μl par puits de microtitration ; ajouter ensuite 50 μl de H2SO4 1 M, réf. X873 par puits).
Quantification photométrique à 450 nm.

Référence bibliographique : Bos E.S. et al. (1981) J. Immunoassay 2, (3/4), 187.


Certificats d'analyse

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Les certificats d'analyse suivants ont été trouvés :

Spécification

Solution 1colourless to light yellow, clear  
Solution 2colourless  
Emission lumineuse après 0, 5, 30 minutes (RLU)complies  

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