EdU Click FC-594

ROTI®kit für Flow Cytometry
Kit zum Nachweis der Zellproliferation mittels Durchflusszytometrie.
Marker: 5/6-Sulforhodamine-101-PEG3-AzidAbs. = 584 nm, λEm.= 603 nm)
Für 50 Assays.

EdU Click FC-594
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Lagertemp. +4 °C
Transporttemp.: gekühlt
ADR 9 III • WGK 2
UN-Nr. 3082

  • Äußerst zuverlässig
  • Einfache Handhabung
  • Schnelles Nachweisverfahren (nur 30 Min.)
  • Milde Bedingungen ohne DNA-Denaturierung
  • Modulares System durch Click Chemie
  • Kombinierbar mit vielen Farbstoffen
  • Kompatibel mit Multiplexing
  • keine Zytotoxizität bis zu 1 mM EdU

Die ROTI®kits für Flow Cytometry ermöglichen die Messung der DNA-Synthese in der Durchflusszytometrie. Ähnlich wie bei BrdU-Assays wird bei unserem Assay ein Uracil-Derivat (in diesem Fall Ethinyldesoxyuridin, kurz EdU) in die sich replizierende DNA eingebaut. Zum Nachweis der EdU Moleküle dienen keine Antikörper, stattdessen wird über eine Click-Reaktion direkt ein Fluoreszenzfarbstoff angebunden. Dieser schnelle und elegante Ansatz ermöglicht das direkte Markieren der replizierten DNA mit dem jeweils gewünschten Fluoreszenzfarbstoff, wodurch der Nachweis perfekt an die Mikroskopausstattung angepasst werden kann. Das Protokoll umfasst nur wenige Arbeitsschritte und verringert signifikant die Gesamtarbeitszeit.

Abbildung: HeLa-Zellen ohne (A/C) und nach Behandlung mit 10 µM EdU für 2 Stunden (B/D). Die Click-Reaktion wurde unter Verwendung von 6-FAM-Azid durchgeführt. A: Negativkontrolle; Zellen ohne EdU-Einbau. B: nicht proliferierenden Zellen ohne EdU Einbau (linker Peak in blau) und proliferierende Zellen (S-Phase) mit eingebautem EdU und anschließender Markierung mit 6-FAM-Azid (rechter Peak in grün). Dichte von PI gefärbten Proben ohne (C) und nach (D) EdU Inkubation und anschließender Click-Reaktion. Die y-Achse stellt die FL1-Fluoreszenz Intensität und die x-Achse den Gehalt an DNA mit FL3-Bereich gemessen dar. Zellzyklus-Phasen sind als G1, S und G2/M Phase bezeichnet.

Die Zahl am Ende des Produktnamens gibt die Wellenlänge an, bei welcher der im Kit enthaltene Fluoreszenzfarbstoff optimal angeregt wird.


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H411-EUH208

EdU Click FC-594

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Technische Informationen

Bestandteile:
EdU10 mg
5/6-Sulforhodamine-101-PEG3-Azide (10 mM in DMSO)130 µl
DMSO5 ml
Fixative Solution5 ml
Saponin Reagent50 ml
Catalyst Solution2 ml
Buffer Additive400 mg

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