EdU Click HTS 4-555

ROTI®kit für High Throughput Screening
Zur schnellen und spezifischen Detektion der Zellproliferation im High Throughput Screening.
Marker: 5-TAMRA-PEG3-AzidAbs. = 546 nm, λEm.= 579 nm)
Für 400 Reaktionen oder 4 x 96-Well-Platten.

EdU Click HTS 4-555
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Lagertemp. s. u. RT/+4 °C
Transporttemp.: gekühlt
ADR 9 III • WGK 2
UN-Nr. 3082

  • Äußerst zuverlässig
  • Einfache Handhabung
  • Schnelles Nachweisverfahren (nur 30 Min.)
  • Milde Bedingungen ohne DNA-Denaturierung
  • Modulares System durch Click Chemie
  • Kombinierbar mit vielen Farbstoffen
  • Kompatibel mit Multiplexing
  • keine Zytotoxizität bis zu 1 mM EdU

Die ROTI®kits für High Throughput Screening ermöglichen die Messung der DNA-Synthese adhärenter Zellen im 96-Well-Platten Format. Ähnlich wie bei BrdU-Assays wird bei unserem Assay ein Uracil-Derivat (in diesem Fall Ethinyldesoxyuridin, kurz EdU) in die sich replizierende DNA eingebaut. Zum Nachweis der EdU Moleküle dienen keine Antikörper, stattdessen wird über eine Click-Reaktion direkt ein Fluoreszenzfarbstoff angebunden. Dieser schnelle und elegante Ansatz ermöglicht das direkte Markieren der replizierten DNA mit dem jeweils gewünschten Fluoreszenzfarbstoff, wodurch der Nachweis perfekt an die Mikroskopausstattung angepasst werden kann. Weiterhin ist die Reaktion hochselektiv, weswegen praktisch keine unspezifische Markierung auftritt. Das Protokoll umfasst nur wenige Arbeitsschritte und verringert signifikant die Gesamtarbeitszeit.

Abbildung: EdU-Hochdurchsatzscreen zur Zellproliferation: Dargestellt ist die EdU Inkorporation über Zeit (2, 4, und 6 Stunden) und steigender HeLa-Zellanzahl bei einer Konzentration von 10 µM.

Kontrolle: ohne EdU-Zugabe wurde nach 6 Stunden kein Fluoreszenzsignal detektiert.

Abbildung: Fluoreszenzsignale von 2 Wells: Well C9 wurde für 6 Stunden mit EdU inkubiert; Well G9: keine Inkubation mit EdU.

Die Zahl am Ende des Produktnamens gibt die Wellenlänge an, bei welcher der im Kit enthaltene Fluoreszenzfarbstoff optimal angeregt wird.


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Achtung H315-H319-H411-EUH031

EdU Click HTS 4-555

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Technische Informationen

Bestandteile:
20x EdU4 ml
5-TAMRA-PEG3-Azide (10 mM in DMSO)2 x 130 µl
Reaction Buffer40 ml
Catalyst Solution1 ml
Buffer Additive400 mg
Rinse Buffer2 x 6 ml
Lagertemp. +4 °C (20x EdU, 5-TAMRA-PEG3-Azide, Catalyst Solution); RT (Reaction Buffer, Buffer Additive, Rinse Buffer)

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