Roti®-Fect Plus

CELLPURE® für die Transfektion
Zur Transfektion aller eukaryontischer Zellen in Kultur, vor allem für schwer transfizierbare Zelllinien.
Ca. 500 Transfektionen pro ml im 24well-Format, zelllinienabhängig.

Roti<sup>®</sup>-Fect Plus
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WGK 1

  • Besonders niedrige Zelltoxizität
  • Hervorragende Transfektionseffizienz bei allen Zelllinien
  • Empfohlen bei schwer transfizierbaren Zelllinien
  • Besonders geeignet für primäre Zellen
  • Ausgezeichnete Reproduzierbarkeit
  • Keine Hemmung durch Serum

Modernes Transfektionsagenz zur liposomenvermittelten Transfektion eukaryontischer Zelllinien und primärer Zellen in Kultur. Roti®-Fect PLUS verringert die toxischen Effekte der Transfektion und kann somit auch bei sehr sensitiven Zelllinien oder primären Zellen angewandt werden.

Besonders geeignet ist Roti®-Fect PLUS, wenn nach Transfektion in vivo Analysen angeschlossen werden sollen (z.B. siRNA-Assays oder in vivo life Mikroskopie), da der Zellstress minimiert und damit u.a. die Rate Apoptose-induzierter Zellen reduziert wird. Zusätzlich ist die Stabilität der Nukleinsäure/Lipid-Komplexe im Vergleich zum Roti®-Fect etwas verringert, was die Freisetzung der Nukleinsäure in den Zellen erleichtert.

Die neue Liposomenformulierung von Roti®-Fect PLUS garantiert somit schonende und hocheffiziente Transfektionen, auch bei schwer transfizierbaren oder sehr sensitiven Zelllinen.

Erfolgreich getestet auf folgenden Zelltypen:

siRNA: 1BR3, HEK293, HeLa, LN-308, T98G. U87MG, UACC-257
Primäre Zellen: 1BR3, 8VM, CGN, HMEC, HUVEC, PBMC, S15VM
Zelllinien: 1BRneo, 143B, 293T, NSCLC, alphaTC1, B16-F10, BHK-21, C2C12, C6, CHO, CHO-K1, Colo205, COS-7, EVLC2, HaCaT, HAEC, HCT116, HEK293, HeLa, HepG2, Hep 3B, IMR32, Jurkat, Kelly, KG1, La1-5S, LN-308, M2-10B4, MDCK, MEF, MG-63, MIN6, MLEC32, mPAC, mpkCCD, N18TG2, N2a, N-Tera2, NG NIH-3T3, Panc-1, PC 12, Phi-NX, Raji, RAW264.7, RD, RF24, RGE, S2, S91, SMA-560, SK-N-BE, SW480, T98G, U-2 OS, Vero, u.a.

Abbildung:
Mittels Roti®-Fect PLUS transfizierte Zellen.
A: Fluoreszenzlicht (520 nm), B: Normallicht.

Oben: COS7-Zellen (0,5 x 105 Zellen / cm2 im 24-well). Transfektion nach 24 h mit 0,9 µg pCMV-GFP + 3,6 µl Roti®-Fect PLUS (Verhältnis 1:4). Auswertung nach 48 h.

Unten: BHK-Zellen (0,2 x 105 Zellen / cm2 im 24-well). Transfektion nach 24 h mit 0,3 µg pCMV-GFP + 1,2 µl Roti®-Fect PLUS (Verhältnis 1:4). Auswertung nach 48 h.

Abbildung:

Transfektionseffizienz in Abhängigkeit vom Verhältnis DNA zu Roti®-Fect PLUS. Die optimale Zusammensetzung des Transfektionskomplexes beträgt für die meisten Zelllinien 1:3 bis 1:4.

Vero: 1,2 x 105 Zellen / cm2; MDCK: 1,2 x 105 Zellen / cm2; COS7: 5 x 104 Zellen / cm2; HeLa: 1 x 105 Zellen / cm2. Transfektionen mit pCMV-LacZ 24 h nach Aussäen im 48 well in serumfreiem DMEM. Auswertung (ONPG-Assay) nach 48 h.

Abbildung:

Transfektioneffizienz von Roti®-Fect PLUS in Prozent. Zur Standardisierung wurde die Transfektionseffizienz von Roti®-Fect = 100 % verwendet. Im Vergleich zu Roti®-Fect erzielt Roti®-Fect PLUS wenigstens vergleichbare Ergebnisse. Bei einigen Zelllinien, die durch Roti®-Fect schwer zu transfizieren sind wie Vero, CV1 oder CHO-K1 Zellen, erreicht Roti®-Fect PLUS eine um etliche 100 % gesteigerte Transfektionseffizienz.


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Roti®-Fect Plus

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