Roti®-Quant universal


Zur Proteinbestimmung (PCA-verstärkte Biuretreaktion) mit hoher Toleranz gegenüber Detergenzien, Salzen und Alkoholen.

Roti<sup>®</sup>-Quant universal
Dichte (D) 1,37
Lagertemp. +20 °C
ADR 9 III • WGK 2
UN-Nr. 3082

  • Äquivalent zum BCA-Assay
  • Sehr einfache Handhabung
  • Hochsensitive Messungen bis zu 0,5 µg Protein
  • Linearer Messbereich von 0,5 bis 200 µg Protein
  • Einsetzbar im 1-ml-Maßstab und in Mikrotiterplatten (automatisierbar)
  • Messung mit Standardfiltern (492 nm Wellenlänge) oder bei 503 nm Wellenlänge
  • Reaktionsbeschleunigung und Sensitivitätssteigerung in der Wärme

Colorimetrischer Test zur Detektion und Quantifizierung von löslichen Proteinen. Universal einsetzbar. Die spezielle Formulierung der Reagenzien bewirkt eine hohe Toleranz gegenüber störenden Faktoren wie Detergenzien, Alkoholen oder Puffersalzen und macht den Kit zu einem universellen Werkzeug zur Messung von Proteinen in nahezu jeder Lösung.

Die PCA-verstärkte Biuret-Reaktion gleicht im Mechanismus dem bekannten BCA-Protein-Assay. Sie resultiert in einer strahlend blauen Farbe, die mit Standardfiltern von etwa 500 nm Wellenlänge gemessen werden kann.

Abb. A: Roti®-Quant universal, Standardkurve mit BSA (bovines Serum-albumin). Leerwert-korrigiert. Messung von je 100 µl Proteinlösung.

Abb. B: Unabhängigkeit des Roti®-Quant-universal-Ansatzes von Detergenzien und anderen Zusatzstoffen, Beispiele. Leerwert-korrigiert. Messung von je 100 µl Proteinlösung.

(Mit freundlicher Genehmigung von Dr. Angelika Böttger, Zoologisches Institut, Ludwig-Maximilians-Universität München)

Mechanismus

Roti®-Quant universal basiert auf einer Biuret-Reaktion in Kombination mit einer hochspezifischen colorimetrischen Enhancer-Reaktion. Im alkalischen Reaktionsmedium des Testes werden die Cu++ Ionen des Reagenzes 2 zu Cu+ Ionen reduziert. Die Farbentwicklung der kupferspezifischen Enhancer-Reaktion ist direkt proportional zu der Konzentration des anwesenden Proteins. Die entstehenden purpurfarbenen Kupferkomplexe entwickeln eine starke Lichtabsorption mit einem Maximum bei 503 nm, wobei das breite Maximum der Absorptionskurve auch hochsensitive und verlustfreie Messungen bei 492 nm zulässt. Dabei bildet die Reaktion keine echte Endpunkt-Messung: die Farbe entwickelt sich bei Raumtemperatur langsam und kann in der Wärme beschleunigt werden, sodass selbst bei kürzeren Zeiten eine höhere Sensitivität erreicht wird.

Abb. D: Unabhängigkeit des Roti®-Quant-universal-Ansatzes von SDS. Mikroansatz in Mikrotiterplatten (60 min, 37 °C).

Der Kit enthält:
500/200 ml Roti®-Quant universal Reagenz 1 (Best.-Nr. 0118) und 40/16 ml Roti®-Quant universal Reagenz 2 (Best.-Nr. 0119).
Ausreichend für 500/200 Ansätze in Photometerküvetten bzw. 5000/2000 Ansätze in Mikrotiterplatten.
Die Einzelbestandteile dieses Kits können nicht separat nachgekauft werden.


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Gefahr H315-H318-H411

Roti®-Quant universal

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