Nickel-beladene IDA-Agarose-Beads für die Niederdruck-Affinitätschromatographie. Suspension in 20 % Ethanol.

Geeignet für alle Standardanwendungen oder wenn in besonders geringer Menge vorhandene Proteine ohne Verlust aufgereinigt werden sollen.

• Ein-Schritt Aufreinigung von His-tag Proteinen aus Gesamtlysat
• Sehr hohe Ausbeute reiner His-tag Proteine
• Bindungskapazität (gereinigtes 6xHis-Protein) von 117 mg pro ml Matrix
• Einfache Elution und Regeneration
• Sehr geringe Nickelverunreinigung des Eluates
• Kompatibel mit denaturierenden und reduzierenden Reagenzien
• Für Batch-Verfahren und Schwerkraft-Säulenchromatographie

Die Immobilisierte Metallionen-Affinitäts-Chromatographie (IMAC) ist nach wie vor die häufigste Methode, um mit vertretbarem Aufwand hohe Ausbeuten sehr reiner Proteine zu erhalten. Roti^®garose His/Ni Beads bieten die perfekte Lösung für Ihre spezifischen Applikationen im Bereich der Benchtop-Säulenchromatographie oder Proteinisolation im Batchverfahren.

Abbildung: SDS-PAGE mit 6xHis-Fuculosealdolase, 28 kDa (Pfeile). Sehr hohe Ausbeute gut gereinigter Proteine.

1: Marker, 2: Proteinrohextrakt, 3,4: 6xHis-Zielprotein, aufgereinigt mittels Roti^®garose His/Ni Beads bzw. Säule, 5: 6xHis-Zielprotein, aufgereinigt mittels Mitbewerberprodukt.

Die Matrix der Roti^®garose His/Ni Beads besteht aus Agarosekügelchen mit 6 % crosslinked Agarose, IDA-konjugiert und beladen mit bivalenten Nickelionen. Nickelchelate erkennen zwei exponierte Histidine mit guter Spezifität und sehr hoher Affinität, was die Ni²⁺ geladene Matrix bei allen Standardanwendungen zur ersten Wahl macht. Roti^®garose His/Ni Beads erzielen sehr hohe Ausbeuten reiner His-getagter Proteine mit sehr niedriger Metallionen-Kontamination. Der dreiarmige IDA Crosslinker ermöglicht die einfache Elution mit niedrigen Mengen an Imidazol. Zusätzlich können die Roti^®garose Beads mehrfach regeneriert werden und sind hierdurch besonders kosteneffizient.

Die Matrix ist in allen üblichen Reagenzien stabil, auch in reduzierenden und denaturierenden Reagenzien wie 8 M Harnstoff, 6 M Guanidinhydrochlorid und 5 mM DTT. Autoklavierbar bei 121 °C, 30 Min.