Technisches Datenblatt
ROTITEST®Annexin V
Siedepunkt (Sdp) 100 °C
Schmelzpunkt (F) 0 °C
Lagertemp.: +4 °C
WGK 1
Lagerung lichtgeschützt. Nicht einfrieren.
1 Set ist ausreichend zur Analyse von 50 Proben zu je 105 Zellen.
249,00 €/VE
zzgl. MwSt. | 1 Kit pro VE
Best.-Nr. 7735.1
Produktdetails
Schnelles und einfaches Nachweissystem für apoptotische Zellen, bei gleichzeitiger Unterscheidung von nekrotischen Zellen.
ROTITEST®Annexin V ROTITEST® BioAnalysis Grade, ready-to-use
Während der ersten apoptotischen Stadien einer Zelle wird Phosphatidylserin (PS) vom inneren Membranlayer zur äußeren Oberfläche der Zelle transloziert. Der ROTITEST®Annexin V Kit basiert auf der Ca2+ abhängigen starken Bindung von Annexin V an PS und färbt hierdurch die Zellmembran von Zellen mit gestörter Membran an. Zusätzlich fungiert das Propidiumiodid als Gegenfärbung der Nuklei von Zellen mit offener Membranhülle, also solcher in nekrotischem Abbau.
Als Ergebnis können Zellen mit gelb-grüner Membranfärbung eindeutig als apoptotisch identifiziert werden, während doppelt gefärbte Zellen (mit gelb-grüner Membran und orange-rotem Nukleus) als nekrotisch eingestuft werden können. Die Auswertung erfolgt mittels Durchflusszytometrie oder fluoreszenzmikroskopischer Analyse.
- Einfache, schnelle Anwendung
- Für adhärente und Suspensionszellen
- Für kultivierte und primäre Zellen (auch Hefezellen)
- Unterscheidet apoptotische und nekrotische Zellen
- Testergebnis in ca. 30 Minuten
Fluoreszenzmikroskopische Analyse von Jurkat-Zellen nach Apoptose-Induktion durch Staurosporin. Assay mit 105 Zellen in 100 µl Annexin-Bindungspuffer, 5 µl Annexin V-FITC-Konjugat und 5 µl Propidiumiodidlösung, 15 Min. RT.
A) FITC-Fluoreszenz (grün), B) Propidiumiodid-Fluoreszenz (rot), C) Hellfeldaufnahme, D) zusammengesetztes Bild. Apoptotische Zellen sind FITC-positiv, PI-negativ. FITC-pos/PI-pos-Zellen können als nekrotisch eingestuft werden. Gesunde Zellen sind FITC/PI-neg.
Eine einfach zu befolgende Gebrauchsanweisung liegt bei.
Annexin V-FITC Konjugat, Propidiumiodid-Lösung, Annexin-Bindungspuffer, detaillierte Anleitung.
Die Einzelbestandteile dieses Kits können nicht separat nachgekauft werden.
Durchflusscytometrische Analyse von Jurkat-Zellen. Assay mit 5 × 105 Zellen in 500 µl Annexin-Bindungspuffer, 25 µl Annexin V-FITC-Konjugat und 25 µl Propidiumiodidlösung, 15 Min. RT.
FITC-A: FITC-Färbung (Bindung Annexin V-FITC Konjugat), PE-A: Propidiumiodid-Färbung
A,B) Zellen nach Apoptose-Induktion durch Staurosporin unter reiner Annexin-FITC-Färbung (A) und unter Annexin-FITC / PI-Färbung (B). C,D) Kontrollzellen ohne Induktion, unter Annexin-FITC / PI-Färbung (C) und ungefärbt(D).
Durch die Bindung von Annexin V an PS auf der Membranaußenseite sind apoptotische Zellen Annexin-FITC-positiv, aber PI negativ (Q4, Kreis). Q3 zeigt gesunde Zellen (neg/neg), Q2 nekrotische Zellen (Annexin-FITC-pos und PI-pos). Zellen in Q1 (PI pos/ Annexin-FITC-neg) sind tote, nicht-apoptotische Zellen.
- Zwischensumme: 0.00
Bestell Nr. | VE | Verp. | Abpackung | Preis | Menge | |
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7735.1 | 1 Kit | Karton | ca. 50 Assays |
249,00 € |
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Analysenzertifikate
Typanalyse
Aussehen Annexin-FITC Lösung | farblos bis gelblich |
Aussehen PI-Lösung | orange bis rot |
Farbstoffgehalt | entspricht |
Aussehen Bindungspuffer | farblos |
pH-Wert Bindungspuffer | 7,3-7,5 |