L-Arginin ¹³C₆¹⁵N₄ Monohydrochlorid, 100 mg, Kunst.

Unsere Aminosäuren sind von höchster Reinheit und für die verschiedensten Anwendungen in der Biochemie geeignet. Neben den natürlich vorkommenden L-Aminosäuren finden Sie hier auch die unnatürlichen D- und DL-Aminosäuren.

Die stabile Isotopenmarkierung mit Aminosäuren in der Zellkultur (SILAC: Stable Isotope Labelling with Amino Acids in Cell Culture) ist eine metabolische Markierungstechnik für die massenspektrometrisch (MS)-basierte quantitative Proteomik. Hierzu werden zwei ursprünglich identische Zellkulturen mit unterschiedlichen Nährmedien gezüchtet. Eine der Zellpopulationen wird mit Wachstumsmedium gefüttert, das nichtmarkierte Aminosäuren enthält. Im Gegensatz dazu wird die zweite Zellkultur mit einem Medium gefüttert, welches eine oder zwei Aminosäuren enthält, die mit stabilen (nicht-radioaktiven), schweren Isotopen markiert sind. Das Medium kann z. B. Arginin enthalten, das mit ¹³C-Kohlenstoff statt des normalen ¹²C-Kohlenstoffs markiert ist. Die Zellen, die in diesem Medium wachsen, bauen das schwere Arginin in alle ihre Proteine ein. Danach sind alle Peptide, die ein einziges Arginin enthalten, 6 Dalton schwerer als ihre normalen Gegenstücke. Im Anschluss werden die Proteine aus beiden Zellpopulationen im Verhältnis 1:1 miteinander vermischt und mittels Massenspektroskopie analysiert. Paare von chemisch identischen Peptiden unterschiedlicher Isotopenzusammensetzung können in einem Massenspektrometer aufgrund ihrer Massendifferenz unterschieden werden. Das Verhältnis der Intensitäten im Massenspektrum für solche Peptidpaare spiegelt das Häufigkeitsverhältnis für die beiden Proteine wider.

Referenzen:
S.-E. Ong and M. Mann, A practical recipe for stable isotope labeling by amino acids in cell culture (SILAC). Nature Protocols 2006, 1, 2650-2660.