Technisches Datenblatt
p-Nitrotetrazoliumblauchlorid, 5 g
Molare Masse (M) 817,65 g/mol
Schmelzpunkt (F) 189 °C
Lagertemp.: +4 °C
WGK 1
CAS Nr. 298-83-9
EG-Nr. 206-067-4
Stammlösung: 0,5 g NBT in 10 ml 70 % Dimethylformamid. Vor Licht und Feuchtigkeit schützen.
369,00 €/VE
zzgl. MwSt. | 5 g pro VE
Best.-Nr. 4421.4
Produktdetails
p-Nitrotetrazoliumblauchlorid ≥98 %, p.a.
Anwendung in Kombination mit BCIP-Toluidinsalz (X-Phosphat) zum Nachweis der alkalischen Phosphatase-Aktivität durch Bildung eines Indigo-Farbstoff-Präzipitats. Farbverstärker der Färbung mittels Alkalischer Phosphatase.
Bei der Dimerisierung des ketonisierten X-Phos werden H+-Ionen frei, die NBT zum purpurnen Diformazan reduzieren. Beide Farbstoffe fallen in der Nähe der Phosphatase aus und färben die konkrete Stelle dunkelviolett. Siehe auch Versuchsprotokoll zur Anwendung von BCIP/NBT bei Immunoblot-Verfahren.
| Anwendung | Western, in situ, Histochemie |
| Enzym | Alkalische Phosphatase |
| Nachweis | Farbe (braun-violett) |
| Signalprodukt | Präzipitat (Blot) |
| Verwendung | Western, in situ, Histochemie |
- Zwischensumme: 0.00
| Bestell Nr. | VE | Verp. | Preis | Menge | |
|---|---|---|---|---|---|
| 4421.1 | 100 mg | Glas |
21,50 € |
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| 4421.2 | 500 mg | Glas |
55,90 € |
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| 4421.3 | 1 g | Glas |
105,00 € |
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| 4421.4 | 5 g | Glas |
369,00 € |
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Aktuell kein Liefertermin verfügbar
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- Zwischensumme: 0.00
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Allgemeine Informationen
Stammlösungen (Stabilität bei +4 °C ein Jahr):
0,5 g NBT in 10 ml 70 % Dimethylformamid.
0,5 g BCIP-p-Toluidinsalz in 10 ml 100 % Dimethylformamid.
Inkubationspuffer für die Alkalische Phosphatase:
100 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 100 mM TRIS (pH 9,5).
Frische Substratlösung: 66 μl der NBT-Stammlösung + 10 ml des Inkubationspuffers, gut mischen, 33 μl BCIP Stammlösung hinzufügen. Innerhalb einer Stunde verbrauchen.
Blot-Entwicklung: Ca. 10 ml der Substratlösung pro 15 x 15 cm2 Membranoberfläche. Entwicklung bei Raumtemperatur, bis Banden sichtbar werden (ca. 30 min).
Reaktions-Stopp: Mit PBS/20 mM EDTA spülen.
1 mg TMB in 0,1 ml Dimethylsulfoxid (Best.-Nr. 4720) auflösen. 9,9 ml einer 0,1 M Natriumacetat-Lösung (pH 6,0) (Pulver: Best.-Nr. 6779) hinzufügen, filtern und H2O2 (Best.-Nr. 8070) (Endkonzentration 0,01 %) zugeben.
Immer frisch ansetzen!
Inkubation 10-30 min bei Raumtemperatur (ca. 50 μl pro Mikrotiterwell; anschließend Zugabe von 50 μl 1 M H2SO4, Best.-Nr. X873, pro Well).
Photometrische Quantifizierung bei 450 nm.
Literaturhinweis: Bos E.S. et al. (1981) J. Immunoassay 2, (3/4), 187.
Analysenzertifikate
Typanalyse
| Gehalt (HPLC) | ≥98 % |
| Wasser (KF) | ≤5,0 % |