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3,3',5,5'-Tetramethylbenzidin Dihydrochlorid, 500 mg

≥99 %, für die Biochemie
VE
Verp.
TMB · 2 HCl, TMB Dihydrochlorid
Summenformel C16H20N2 · 2 HCl
Molare Masse (M) 313,27 g/mol
Schmelzpunkt (F) 300 °C
Lagertemp.: -20 °C
WGK 1
CAS Nr. [207738-08-7]
EG-Nr. 264-769-6

Wasserlösliches Peroxidase-Substrat
Stammlösung: 0,1 mg/ml in 50 % Essigsäure oder Phosphatcitratpuffer (50 mM NaH2PO4, 25 mM Citronensäure, pH 5,0). Zum Lösen erhitzen auf 45 °C und sonifizieren. Farblos.

Lagerung der Stocklsg.: Fest verschlossen bei +4 °C. Oxidation zeigt sich an einer leichten Blaufärbung.

Arbeitslösung: Direkt vor Benutzung Zugabe von 2 μl / 10 ml 30 % Wasserstoffperoxid.

(Liem et al. (1979) Anal Biochem, 98:388-93).

Tetramethylbenzidin-dihydrochlorid wird als hochsensitives Substrat für die Detektion von mit Meerrettich-Peroxidasen (HRP) markierten Sonden verwendet, vor allem bei Assays in Lösung wie ELISAs. Beim Substratumsatz entsteht ein lösliches blaues Farbreagenz, das spektrophotometrisch nachgewiesen werden kann. Das Dihydrochlorid ist leicht wasserlöslich und kann im Labor einfach eingesetzt werden.
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zzgl. MwSt. | 500 mg pro VE

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3,3',5,5'-Tetramethylbenzidin Dihydrochlorid ≥99 %, für die Biochemie

Tetramethylbenzidin-dihydrochlorid wird als hochsensitives Substrat für die Detektion von mit Meerrettich-Peroxidasen (HRP) markierten Sonden verwendet, vor allem bei Assays in Lösung wie ELISAs. Beim Substratumsatz entsteht ein lösliches blaues Farbreagenz, das spektrophotometrisch nachgewiesen werden kann. Das Dihydrochlorid ist leicht wasserlöslich und kann im Labor einfach eingesetzt werden.



Technische Informationen
Enzym Meerrettich-Peroxidase 
Nachweis Farbe (blau) 
Signalprodukt löslich (ELISA) 
3,3',5,5'-Tetramethylbenzidin Dihydrochlorid
Ausgewählte Menge:   0
  1. Zwischensumme:  0.00
Bestell Nr. VE Verp. Preis Menge
4107.1 500 mg Glas 39,50 €
4107.2 1 g Glas 63,90 €
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Allgemeine Informationen

Versuchsprotokoll zur Anwendung von BCIP-p-Toluidinsalz/NBT bei Immunoblot-Verfahren:

Stammlösungen (Stabilität bei +4 °C ein Jahr):
0,5 g NBT in 10 ml 70 % Dimethylformamid.
0,5 g BCIP-p-Toluidinsalz in 10 ml 100 % Dimethylformamid.
Inkubationspuffer für die Alkalische Phosphatase:
100 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 100 mM TRIS (pH 9,5).
Frische Substratlösung: 66 μl der NBT-Stammlösung + 10 ml des Inkubationspuffers, gut mischen, 33 μl BCIP Stammlösung hinzufügen. Innerhalb einer Stunde verbrauchen.
Blot-Entwicklung: Ca. 10 ml der Substratlösung pro 15 x 15 cm2 Membranoberfläche. Entwicklung bei Raumtemperatur, bis Banden sichtbar werden (ca. 30 min).
Reaktions-Stopp: Mit PBS/20 mM EDTA spülen.


Ansatz für den Nachweis der Peroxidase-Aktivität (Immunoassay):

1 mg TMB in 0,1 ml Dimethylsulfoxid (Best.-Nr. 4720) auflösen. 9,9 ml einer 0,1 M Natriumacetat-Lösung (pH 6,0) (Pulver: Best.-Nr. 6779) hinzufügen, filtern und H2O2 (Best.-Nr. 8070) (Endkonzentration 0,01 %) zugeben.

Immer frisch ansetzen!

Inkubation 10-30 min bei Raumtemperatur (ca. 50 μl pro Mikrotiterwell; anschließend Zugabe von 50 μl 1 M H2SO4, Best.-Nr. X873, pro Well).
Photometrische Quantifizierung bei 450 nm.

Literaturhinweis: Bos E.S. et al. (1981) J. Immunoassay 2, (3/4), 187.


Analysenzertifikate

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Gehalt (titr.)≥99 %  
Lösung (1 % in Methanol)farblos bis grün-gelb  
Wasser (KF)≤5 %  
Sulfatasche≤0,1 %  

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