Les méthodes de détection immunologique jouent un rôle central dans la recherche biomédicale moderne et le diagnostic. Elles permettent de détecter, de quantifier et d’analyser la fonction de molécules spécifiques, en particulier des protéines, dans une grande variété d’échantillons. Au cours des dernières décennies, ces techniques se sont développées et offrent désormais un large éventail d’approches adaptées à des questions de recherche spécifiques.
Méthodes de détection basées sur les protéines
Méthodes de détection basées sur les protéines
Les méthodes de détection basées sur les protéines reposent sur la liaison spécifique des anticorps aux protéines cibles afin de les détecter de manière qualitative et/ou quantitative. Ces techniques sont essentielles pour analyser l’expression des protéines, les modifications moléculaires, les interactions et les propriétés fonctionnelles des protéines. Des méthodes comme le test immuno-enzymatique (ELISA), le Western blot (WB) ou l’immunoprécipitation (IP) font partie des techniques standards en recherche biomédicale et en diagnostic. Elles diffèrent par la préparation des échantillons, la sensibilité, le débit et le principe de détection, mais permettent dans l’ensemble une analyse très précise des structures cibles spécifiques.
- Test immuno-enzymatique (ELISA)
- Western Blot (WB)
- Immunoprécipitation (IP)
- Radioimmunoessai (RIA)
- Études fonctionnelles
Méthodes de détection basées sur les cellules
Méthodes de détection basées sur les cellules
Les techniques immunologiques cellulaires sont utilisées pour localiser les antigènes directement dans les cellules ou les tissus. Elles combinent des principes immunologiques avec des techniques morphologiques et microscopiques, permettant ainsi d’étudier la distribution cellulaire ou subcellulaire des protéines. L’immunohistochimie (IHC) et l’immunocytochimie (ICC) utilisent des marquages enzymatiques ou fluorescents pour rendre visibles les antigènes cibles, tandis que l’immunofluorescence (IF) offre une détection haute résolution sur plusieurs canaux spectraux. Ce spectre est complété par la microscopie électronique immunologique (IEM), qui permet même des détections ultrastructurales. Ces méthodes sont particulièrement importantes en pathologie, en biologie cellulaire et dans l’analyse fonctionnelle.
- Immunohistochimie (IHC)
- Immunocytochemie (ICC)
- Immunofluorescence (IF)
- Microscopie électronique immunologique (IEM)
Techniques cytométriques
Techniques cytométriques
Les techniques cytométriques permettent une analyse multiparamétrique rapide de cellules individuelles. Au cœur de ces méthodes se trouve la cytométrie en flux, qui permet de phénotyper et de caractériser fonctionnellement des populations cellulaires à l’aide de marqueurs spécifiques de surface ou intracellulaires. Les avancées récentes, comme la cytométrie de masse (CyTOF), élargissent considérablement la gamme des approches disponibles, rendant possible l’analyse simultanée de plus de 40 marqueurs par cellule. Les techniques cytométriques sont des outils indispensables en immunophénotypage, diagnostic du cancer, développement de vaccins et recherche fondamentale en immunologie.
- Cytométrie en flux
- Cytométrie de masse (CyTOF)