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4-Nitrophényl phosphate, sel disodique hexahydraté, 2.5 g
Masse moléculaire (M) 371,12 g/mol
Point de fusion >300 °C
Temp. de stockage : -20 °C
Temp. de transport: temp. ambiante
WGK 1
Nr. CAS 4264-83-9
EG-Nr. 224-246-5
19,90 €/cdt.
TVA en sus. | 2,5 g par cdt.
Réf. 4165.1
Données du produit
4-Nitrophényl phosphate, sel disodique hexahydraté ≥99 %, pour la biochemie
Substrat de la phosphatase alcaline pour une utilisation en ELISA. Lors de la transformation du pNPP, il y a formation d’un produit soluble jaune, qui peut être détecté par photométrie à 405 nm.
Solution de travail : 1 mg/ml dans un tampon de substrat diéthanolamine (10 mM de diéthanolamine, 0,5 mM de MgCl2, pH 9,5).
Afin d’analyser la fin de réaction, celle-ci peut être stoppée par du NaOH 2-3 M.
Enzyme | Phosphatase alcaline |
Mise en évidence | Couleur (jaune) |
Produit signal | soluble (ELISA, test d'activité) |
- Somme intermédiaire : 0.00
Réf. | Cdt. | Emb. | Prix | Quantité | |
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4165.1 | 2,5 g | verre |
19,90 € |
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4165.7 | 100 g | verre |
235,45 € |
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4165.9 | 25 g | verre |
84,40 € |
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Disponible
En cours d’approvisionnement
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Date de livraison inconnue à l'heure actuelle
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- Somme intermédiaire : 0.00
Téléchargements / FDS
Informations générales
Solutions mères (stable un an, si conservée à 4 °C) :
0,5 g de NBT dans 10 ml de diméthylformamide à 70 %.
0,5 g de BCIP-sel de p-toluidine dans 10 ml de diméthylformamide à 100 %.
Tampon d’incubation pour la phosphatase alcaline :
100 mM de NaCl, 5 mM de MgCl2, 100 mM de TRIS (pH 9,5).
Solution de substrat fraîche : 66 μl de solution mère NBT + 10 ml de tampon d’incubation, bien mélanger, ajouter 33 μl de solution mère BCIP. Utiliser en l’espace d’une heure.
Développement de blot : Env. 10 ml de solution de substrat par surface de membrane de 15 x 15 cm2. Développement à température ambiante, jusqu’à ce que les bandes deviennent visibles (30 min. environ).
Arrêt de réaction : rincer avec PBS/EDTA 20 mM.
Dissoudre 1 mg de TMB dans 0,1 ml de diméthylsulfoxyde (réf. 4720). Ajouter 9,9 ml d’une solution d’acétate de sodium 0,1 M (pH 6,0) (poudre : réf. 6779), filtrer et ajouter H2O2 (réf. 8070) (concentration finale 0,01 %).
Utiliser toujours des solutions de travail fraîchement préparées !
Incubation pendant 10 à 30 minutes à température ambiante (env. 50 μl par puits de microtitration ; ajouter ensuite 50 μl de H2SO4 1 M, réf. X873 par puits).
Quantification photométrique à 450 nm.
Référence bibliographique : Bos E.S. et al. (1981) J. Immunoassay 2, (3/4), 187.
Certificats d'analyse
Spécification
Aspect | poudre cristalline presque blanche à jaune-claire |
Teneur (HPLC) | ≥99.0 % |
Eau | 27.0-31.5 % |
pH (5 % dans H2O) | 8.0-10.5 |