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ROTI®DAB Kit
Temp. de transport: réfrigérée
WGK 1
Kit substrat pour la détection d’activité HRP sur les membranes de transfert et les lames porte-objet
231,15 €/cdt.
TVA en sus. | 1 kit par cdt.
Réf. 9202.1
Convient à / Accessoires
Données du produit
Le kit substrat DAB pour la révélation de l’activité peroxydase (HRP) sur les immunoblots, les préparations en immunohistochimie et cytochimie et lors de l’hybridation in situ.
Le kit ROTI®DAB contient un substrat, un tampon et un réactif d’activation et possède ainsi les trois solutions requises pour une révélation HRP. L’application est extrêmement simple - les trois solutions en kit sont diluées dans l’eau en parties égales et les membranes de transfert ou les lames porte-objet sont incubées dans cette solution de substrat. Les bouteilles compte-gouttes permettent ici une manipulation extrêmement conviviale.
ROTI®DAB Kit pour l’immunochimie
La DAB est oxydée par la HRP et forme un précipité brun, insoluble dans les solvants aqueux et organiques, qui peut être détecté à la lumière ordinaire et qui ne blanchit pas même lors d’un stockage prolongé.
A/a : méthode de base vaec 0,6 mg/ml DAB dans tampon Tris.
B/b : détection à l’aide du kit ROTI®DAB.
L’utilisation supplémentaire de l’amplificateur métal DAB Metal Enhancer (réf. 9204) permet de doubler l’intensité du signal. Les lames porte-objet peuvent ainsi être enfermées en permanence dans un milieu de confinement aqueux ou, après déshydratation, dans un milieu de confinement anhydre.
Une solution DAB (réf. 9869), un tampon DAB (réf. 9870) et un réactif d’activation (réf. 9871) en flacons compte-gouttes. Les composants unitaires de ce kit ne peuvent pas être achetés séparément.
Application | Western, in situ, Histochimie |
Enzyme | Peroxydase du raifort |
Mise en évidence | Couleur (marron) |
Produit signal | Précipiter (Blot) |
- Somme intermédiaire : 0.00
Réf. | Cdt. | Emb. | Cdt. | Prix | Quantité | |
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9202.1 | 1 kit | carton | pour ca. 44 assays, flac. compte-gouttes |
231,15 € |
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En stock
Disponible
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Date de livraison inconnue à l'heure actuelle
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- Somme intermédiaire : 0.00
Téléchargements / FDS
Informations générales
Solutions mères (stable un an, si conservée à 4 °C) :
0,5 g de NBT dans 10 ml de diméthylformamide à 70 %.
0,5 g de BCIP-sel de p-toluidine dans 10 ml de diméthylformamide à 100 %.
Tampon d’incubation pour la phosphatase alcaline :
100 mM de NaCl, 5 mM de MgCl2, 100 mM de TRIS (pH 9,5).
Solution de substrat fraîche : 66 μl de solution mère NBT + 10 ml de tampon d’incubation, bien mélanger, ajouter 33 μl de solution mère BCIP. Utiliser en l’espace d’une heure.
Développement de blot : Env. 10 ml de solution de substrat par surface de membrane de 15 x 15 cm2. Développement à température ambiante, jusqu’à ce que les bandes deviennent visibles (30 min. environ).
Arrêt de réaction : rincer avec PBS/EDTA 20 mM.
Dissoudre 1 mg de TMB dans 0,1 ml de diméthylsulfoxyde (réf. 4720). Ajouter 9,9 ml d’une solution d’acétate de sodium 0,1 M (pH 6,0) (poudre : réf. 6779), filtrer et ajouter H2O2 (réf. 8070) (concentration finale 0,01 %).
Utiliser toujours des solutions de travail fraîchement préparées !
Incubation pendant 10 à 30 minutes à température ambiante (env. 50 μl par puits de microtitration ; ajouter ensuite 50 μl de H2SO4 1 M, réf. X873 par puits).
Quantification photométrique à 450 nm.
Référence bibliographique : Bos E.S. et al. (1981) J. Immunoassay 2, (3/4), 187.
Certificats d'analyse
Spécification
Test d’aptitude (Blotting) | conforme |
RNAse | ≤1 ppb |
DNase | ≤1 ppm |