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ROTI®Blot K
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Temp. de transport: temp. ambiante
WGK 2
82,25 €/cdt.
TVA en sus. | 1 l par cdt.
Réf. L511.1
Convient à / Accessoires
Données du produit
Système tampon discontinu pour un transfert optimal dans le buvard semi-sec.
- Optimisé pour le transfert semi-sec
- Résultats de transfert optimaux avec peptides et protéines de toutes tailles
- Formulation spéciale à formation d’acide réduite - pour une protection optimale des électrodes.
Dans le système de buvardage semi-sec, on peut utiliser à la fois un système tampon continu (tampon identique à l’anode et à la cathode) et un système tampon discontinu (tampon différent à l’anode et à la cathode). La performance de transfert des systèmes discontinus est généralement plus élevée, puisque les deux tampons sont conçus séparément en fonction des besoins des deux électrodes.
Le système tampon discontinu ROTI®Blot 1 se compose de deux tampons différents, le tampon d’anode A (pH 7,8 ±0,1) et le tampon de cathode K (pH 8,5 ±0,1). ROTI®Blot 1 montre une bien meilleure efficacité de transfert qu’un tampon tris-glycine et peut être utilisé pour des protéines et peptides de toute longueur.
La pile de taches est constituée par trempage des papiers buvards supérieurs avec tampon cathodique et des papiers buvards inférieurs avec tampon anodique. Avec des temps de transfert légèrement plus longs, les protéines >100 kDa peuvent également être entièrement transférées avec ROTI®Blot 1.
Un mode d’emploi détaillé est joint au produit.
ROTI®Blot K 10x conc., pour l’électrophorèse
- Somme intermédiaire : 0.00
Réf. | Cdt. | Emb. | Prix | Quantité | |
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L511.1 | 1 l | verre |
82,25 € |
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Date de livraison inconnue à l'heure actuelle
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- Somme intermédiaire : 0.00
Téléchargements / FDS
Informations générales
Recommandations de tampon pour le transfert humide :
D’après Tobwin et al., 1997 : 25 mM de Tris, 192 mM de glycine, 20 % de méthanol. En option : 0-0,1 % de SDS.
D’après Bjerrum et Schaefer-Nielsen, 1986 : 48 mM Tris, 39 mM de glycine, 0-20 % de méthanol. En option : 0-0,1 % de SDS.
D’après Dunn, 1986: 10 mM de NaHCO3, 3 mM de NaCO3, 20 % de méthanol.
Recommandations de tampon pour le transfert semi-sec :
Système tampon discontinu : ROTI®Blot 1 - avec protéines de toute tailles ou ROTI®Blot 2 - avec protéines hydrophobes.
Tampon Tris-glycine continu d’après Bjerrum et Schaefer-Nielsen, 1986 : 48 mM Tris, 39 mM de glycine, 0-20 % de méthanol. En option : 0,01-0,1 % de SDS (la plupart du temps 0,0375 %).
Tampon CAPS continu pour le transfert de protéines basiques et avant les séquençages N-terminal : 0,22 % CAPS (pH 10,5-11,0), 10 % méthanol.
La valeur du PH d'un tampon de transfert ne doit pas être réglée (exception : solution mère CAPS). L’ajout d’acide ou de base au tampon augmente la conductivité et entraîne un dégagement de chaleur élevé et une formation d’ions renforcée. Il en résulte des papiers de transfert marron / « brûlés » et des dommages sur les plaques d’électrodes.
Le méthanol empêche au gel de gonfler pendant le transfert (absolument nécessaire pour des gels en gradient !) et améliore l’absorption des protéines sur les membranes NC. Pour le transfert de grandes protéines ou de protéines en conditions natives, utiliser peu ou pas de méthanol.
SDS améliore l’efficacité du transfert surtout de grandes protéines et la liaison protéique de membranes PVDF, augmente cependant la tension, l’intensité du courant et la température. Pour le transfert semi-sec de petites protéines sur des membranes NC, ne pas utiliser SDS. Pour le transfert humide, utiliser au moins 0,02 % de SDS.
Pour le transfert de protéines en conditions natives, utiliser le tampon selon Bjerrum et Schaefer-Nielsen avec 0,04 % de SDS et 0-10 % de méthanol.