anti-beta-actin, clone AC-15, mouse monoclonal, 1 ml

Analyse IHC du colon humain en utilisant l’anticorps anti-bêta-actine. L’IHC a été réalisée sur des sections fixées au formol et incluses en paraffine. Les échantillons ont été déparaffinés avec du xylol et de l’éthanol, suivis d’une récupération d’antigène induite par la chaleur avec un tampon de citrate 10 mM. Après la préparation, les tissus ont été bloqués avec du sérum normal pendant 20 minutes à température ambiante. L’anticorps primaire anti-bêta-actine monoclonal de souris, clone AC-15 (Cat. No. 690974) a été dilué dans du PBS (concentration d'anticorps 500 ng/ml) et incubé à 4°C pendant la nuit. L’anticorps secondaire HRP anti-mouse IgG a été incubé pendant 20 minutes à température ambiante. Les lames ont été incubées avec la solution DAB jusqu’à ce qu’une coloration brune soit visible et avec Haemalaun pendant quelques minutes. L’image 20x a été acquise par microscopie (courtoisie de J. Hess, Hôpital universitaire de Heidelberg).

Analyse IHC d’un carcinome épidermoïde humain de la tête et du cou avec l’anticorps anti-bêta-actine (Cat. No. 690974). L’IHC a été réalisée sur des sections fixées au formol et incluses en paraffine. Les échantillons ont été déparaffinés avec du xylol et de l’éthanol, suivis d’une récupération d’antigène induite par la chaleur avec un tampon de citrate 10 mM. Après la préparation, les tissus ont été bloqués avec du sérum normal pendant 20 minutes à température ambiante. L’anticorps primaire anti-bêta-actine monoclonal de souris, clone AC-15, a été dilué dans du PBS (concentration d’anticorps 500 ng/ml) et incubé à 4°C pendant la nuit. L’anticorps secondaire ImmPRESS HRP anti-mouse IgG a été incubé pendant 20 minutes à température ambiante. Les lames ont été incubées avec la solution DAB jusqu’à ce qu’une coloration brune soit visible et avec Haemalaun pendant quelques minutes. L’image 20x a été acquise par microscopie (courtoisie de J. Hess, Hôpital universitaire de Heidelberg).

Analyse par western blot du lysat de HeLa avec l’anticorps anti-bêta-actine. Une analyse par transfert Western a été réalisée sur 20 μg de lysat de HeLa. Les cellules ont été lysées avec le tampon RIPA. La membrane PVDF a été bloquée avec 5 % de lait sec dans du PBST (PBS + 0,1 % de Tween 20) pendant 1 h à température ambiante. L’anticorps primaire anti-bêta-actine monoclonal de souris, clone AC-15 (Cat. No. 690974) a été dilué dans un tampon de blocage (concentration de l’anticorps 0,02 μg/ml) et incubé pendant 1 h à RT. L’anticorps secondaire polyclonal de chèvre anti-IgG de la souris, conjugué à la HRP, a également été dilué dans un tampon bloquant (concentration de l’anticorps 0,4 μg/ml) et incubé pendant 1 h à la température ambiante. Les bandes ont été visualisées par détection chimioluminescente en utilisant le substrat de Western Blotting PierceTM ECL.