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Carl ROTH et baseclick

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Partenariat stratégique entre Carl ROTH et baseclick

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Carl Roth est une entreprise traditionnelle avec plus de 135 ans d'expérience dans la distribution de produits chimiques. En coopérant avec baseclick, une société innovante qui possède une expertise dans le domaine de la chimie click, nous poursuivons l'objectif de développer et de commercialiser efficacement des produits biochimiques pour des clients exigeants. En plus de ses propres brevets, baseclick a acquis une licence mondiale exclusive du Scripps Research Institute pour la technologie click dans le domaine des acides nucléiques. Grâce au partenariat stratégique décrit ici, Carl Roth offrira à ses clients un accès encore plus facile et plus rapide à la chimie Click.

Les réactions click sont populaires auprès des scientifiques en raison de leur rapidité et de leur simplicité, ainsi que de leurs rendements élevés et de leurs conditions de réaction simples. L'une des réactions click les plus connues est la cycloaddition azide-alcyne catalysée par le cuivre (CuAAC), qui combine deux molécules de manière efficace, stéréospécifique et dans des conditions douces. Il suffit que l'un des partenaires de la réaction soit doté d'une fonctionnalité alcyne terminale et l'autre d'une fonctionnalité azide. La chimie click est donc une excellente alternative aux méthodes classiques, plus complexes, de marquage des acides nucléiques et autres biomolécules. En outre, cette réaction se caractérise par sa grande modularité, qui se reflète notamment dans la grande variété de « blocs de construction » proposés.

Carl Roth propose une gamme complète de réactifs Click. Le portefeuille de produits comprend à la fois des produits chimiques Click essentiels tels que le bromure de cuivre ou des ligands pour la stabilisation du cuivre, ainsi que des réactifs qui ont été spécialement modifiés pour la chimie Click, tels que des nucléotides avec des groupes alcynes et des marqueurs fluorescents avec des groupes azides, jusqu'à des essais de prolifération cellulaire prêts à l'emploi pour la microscopie à fluorescence, la cytométrie de flux ou le criblage à haut débit.

Le partenariat stratégique entre les deux entreprises associe l'expertise unique de baseclick dans le domaine de la chimie des clics et l'excellente disponibilité des produits à la vaste expérience de Carl Roth en matière de marketing et de ventes internationales. Nous sommes donc heureux de pouvoir offrir à nos clients exigeants le meilleur service possible sur cette base.

Pour compléter la gamme existante, nous pourrons également vous proposer à l'avenir des oligonucléotides modifiés en coopération avec baseclick.
 

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Réactifs de Clics Généraux

En général, la chimie click peut être divisée en deux réactions de base, la CuAAC (cycloaddition azide-alcyne catalysée par le cuivre) et la SPAAC (cycloaddition azide-alcyne promue par la souche). Alors que le cuivre est utilisé comme catalyseur pour la CuAAC, les substrats ayant une tension de cycle élevée, tels que les dérivés DBCO (dibenzocyclooctyne), sont utilisés pour la SPAAC. Dans la gamme Click, nous proposons divers catalyseurs et ligands, des colorants ou des tags cliquables, mais aussi d'autres linkers pour ces deux réactions.

La gamme comprend divers réactifs pour différents solvants. Ils peuvent être utilisés pour créer des conditions de réaction optimales dans l'environnement concerné :

Solution aqueuse : THPTA + CuSO4 + ascorbate de sodium
Solvants organiques : TBTA + CuBr

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Dans le domaine des colorants fluorescents, nous proposons des colorants dotés des fonctions azide ou alcyne correspondantes pour la CuAAC et la SPAAC catalysées par le cuivre. Les colorants, tels que les azides 6-FAM, ont des propriétés similaires aux colorants couramment disponibles sur le marché, par exemple ATTO488, Alexa Fluor 488, DyLight 488 ou FITC.
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Les biotines marquées à l'azide ou au DBCO peuvent être liées à des biomolécules à l'aide de CuAAC ou de SPAAC et lier ensuite un conjugué fluorescent de streptavidine. Il en résulte une amplification du signal, car la liaison streptavidine-biotine est très forte. Les échantillons peuvent ensuite être examinés par microscopie à fluorescence.
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L'azoture de ferrocène sert de marqueur organométallique, qui peut être détecté par voie électrochimique. Par rapport aux échantillons fluorescents, cette méthode est beaucoup plus rentable et présente des limites de détection peu élevées.
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Notre gamme de produits comprend deux types de réactifs de ciblage cellulaire. Les dérivés azido-trimannose sont couplés à des cibles alcynes et sont reconnus par le récepteur du mannose. Ils sont transportés dans la cellule par endocytose médiée par le récepteur. Les dérivés Tri-Gal-Nac avec DBCO (alcyne) et azides sont utilisés pour marquer des cibles azides et alcynes qui sont reconnues par l'ASGP-R (récepteur de l'asialoglycoprotéine) et transportées dans le tissu hépatique sous forme de siRNA.
En utilisant des linkers bifonctionnels, par exemple des linkers azide-NHS, des fonctionnalités azide peuvent être introduites dans des oligos d'amine après la synthèse en phase solide. Ici, le groupe azide est couplé avec des alcynes via la réaction click et l'ester NHS réagit avec des amines primaires. En outre, nous proposons également des linkers avec DBCO et un autre groupe fonctionnel (par exemple alcyne, ester NHS ou DBCO) pour le SPAAC.
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Modifications de l‘Acide Nucléique
Les analogues de la thymidine dotés d'une fonction alcyne peuvent être incorporés pendant la synthèse de l'ADN/ARN, par exemple l'EdU (pour l'incorporation dans l'ADN) et l'EU (pour l'incorporation dans l'ARN).
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Les nucléotides modifiés par des alcynes et des azides peuvent être incorporés dans l'ADN par PCR à l'aide de polymérases, puis fonctionnalisés à l'aide de la chimie click.
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Les phosphoramidites peuvent être utilisés pour produire des oligonucléotides par synthèse en phase solide de l'extrémité 3' à l'extrémité 5'. Il s'agit de nucléotides/nucléosides dont le groupe hydroxyle 5' est protégé par un groupe DMT afin d'éviter des réactions secondaires indésirables. Après déprotection du groupe OH et activation du phosphoramidite, ils réagissent entre eux. L'acide nucléique peut ensuite être purifié ou étendu.
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Les réactifs de coiffage sont utilisés, par exemple, dans la synthèse d'oligonucléotides ou dans la production d'ARNm pour améliorer la stabilité et la fonctionnalité. Outre les réactifs de coiffage classiques tels que ARCA (Anti-Reverse Cap Analog and Clean Cap), nous proposons également d'autres structures de coiffage à fonctionnalité amine et azide, qui initient la transcription in vitro de l'ARN.
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Kits pour Différents Essais
Dans le domaine des tests de prolifération cellulaire, la gamme offre de nombreuses possibilités d'application telles que l'imagerie, le criblage à haut débit (HTS) et la cytométrie de flux (FC). Des kits sensibles supplémentaires (colorants fluorescents améliorés, signaux plus forts) ou des kits in vivo sont également disponibles à cette fin. Des kits spéciaux pour la prolifération des cellules T sont également disponibles.
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Le kit ClickTech Oligo Link peut être utilisé pour lier des oligos modifiés par des alcynes et des azides, qui ont été produits à l'aide du service Oligo, par exemple, ainsi que pour marquer les oligos modifiés à l'aide d'un marqueur tel qu'un colorant fluorescent.
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Le kit ClickTech DNA FISH et le kit de modification PCR partagent la même approche expérimentale. L'éthynyl polymérase spéciale contenue dans le kit produit des fragments d'ADN marqués en utilisant les dNTP natifs et les EdUTP modifiés par des alcynes. Ces fragments sont ensuite liés à un colorant fluorescent approprié au moyen d'une réaction click. Les échantillons FISH sont produits par hybridation in situ et peuvent être examinés au microscope.
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