Technisches Datenblatt
4-Nitrophenylphosphat Dinatriumsalz Hexahydrat, 25 g
Molare Masse (M) 371,12 g/mol
Schmelzpunkt (F) >300 °C
Lagertemp.: -20 °C
Transporttemp.: Umgebungstemp.
WGK 1
CAS Nr. 4264-83-9
EG-Nr. 224-246-5
CHF 97.10/VE
zzgl. MwSt. | 25 g pro VE
Best.-Nr. 4165.9
Produktdetails
4-Nitrophenylphosphat Dinatriumsalz Hexahydrat ≥99 %, für die Biochemie
Substrat der Alkalischen Phosphatase zur Verwendung in ELISA Ansätzen. Beim Umsatz des pNPP entsteht ein gelbes, lösliches Produkt, das bei 405 nm photometrisch detektiert werden kann.
Arbeitslösung: 1 mg/ml in Diethanolamin-Substratpuffer (10 mM Diethanolamin, 0,5 mM MgCl2, pH 9,5).
Zur Endpunkt-Analyse kann die Reaktion mittels 2-3 M NaOH gestoppt werden.
| Enzym | Alkalische Phosphatase |
| Nachweis | Farbe (gelb) |
| Signalprodukt | löslich (ELISA, Aktivitätsassay) |
- Zwischensumme: 0.00
| Bestell Nr. | VE | Verp. | Preis | Menge | |
|---|---|---|---|---|---|
| 4165.1 | 2,5 g | Glas |
CHF 22.70 |
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| 4165.7 | 100 g | Glas |
CHF 270.00 |
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| 4165.9 | 25 g | Glas |
CHF 97.10 |
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- Zwischensumme: 0.00
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Allgemeine Informationen
Stammlösungen (Stabilität bei +4 °C ein Jahr):
0,5 g NBT in 10 ml 70 % Dimethylformamid.
0,5 g BCIP-p-Toluidinsalz in 10 ml 100 % Dimethylformamid.
Inkubationspuffer für die Alkalische Phosphatase:
100 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 100 mM TRIS (pH 9,5).
Frische Substratlösung: 66 μl der NBT-Stammlösung + 10 ml des Inkubationspuffers, gut mischen, 33 μl BCIP Stammlösung hinzufügen. Innerhalb einer Stunde verbrauchen.
Blot-Entwicklung: Ca. 10 ml der Substratlösung pro 15 x 15 cm2 Membranoberfläche. Entwicklung bei Raumtemperatur, bis Banden sichtbar werden (ca. 30 min).
Reaktions-Stopp: Mit PBS/20 mM EDTA spülen.
1 mg TMB in 0,1 ml Dimethylsulfoxid (Best.-Nr. 4720) auflösen. 9,9 ml einer 0,1 M Natriumacetat-Lösung (pH 6,0) (Pulver: Best.-Nr. 6779) hinzufügen, filtern und H2O2 (Best.-Nr. 8070) (Endkonzentration 0,01 %) zugeben.
Immer frisch ansetzen!
Inkubation 10-30 min bei Raumtemperatur (ca. 50 μl pro Mikrotiterwell; anschließend Zugabe von 50 μl 1 M H2SO4, Best.-Nr. X873, pro Well).
Photometrische Quantifizierung bei 450 nm.
Literaturhinweis: Bos E.S. et al., 1981, J. Immunoassay 2, (3/4), 187.
Analysenzertifikate
Typanalyse
| Aussehen | fast weißes bis hellgelbes kristallines Pulver |
| Gehalt (HPLC) | ≥99,0 % |
| Wasser | 27,0-31,5 % |
| pH-Wert (5 %, Wasser) | 8,0-10,5 |