ClickTech EdU Cell Proliferation Kit 488 in vivo, M (500 mg additional EdU)

L’azoture-alcyne cycloaddition catalysée par cuivre (I) (CuAAC) est l’exemple le plus important d’un groupe de réactions nommés « réactions click ». Selon la définition de Sharpless, ces réactions sont caractérisées par des rendements élevés, des conditions douces, et par leur tolérance d’une large gamme de groupes fonctionnels.^[1-3] Généralement, les réactions nécessitent une simple ou aucun purification du produit. La caractéristique la plus importante de cette réaction (CuAAC) est son bioorthogonalité unique, car ni azotures, ni alcynes ne sont généralement présents comme groupement fonctionnel dans les systèmes naturels.

Références :
1 H. C. Kolb, M.G. Finn, K. B. Sharpless, Angew. Chem. Int. Ed. 2001, 40, 2004-2021.
2 C.W. Tornoe, C. Christensen, M. Meldal, J. Org. Chem. 2002, 67, 3057-3064.
3 V. V. Rostovtsev, L. G. Green, V. V. Fokin, K. B. Sharpless, Angew. Chem. 2002, 114, 2708-2711; Angew. Chem. Int. Ed. 2002, 41, 2596-2599.

Ces dernières années, la chimie click a pris de l’importance et a connu une popularité sans cesse croissante dans la recherche et le développement. Les raisons en sont, outre la facilité d’utilisation et les rendements élevés, les innombrables possibilités d’application. Carl ROTH vous offre la possibilité d’acquérir le large portefeuille de réactifs click, divers kits pour les essais de prolifération cellulaire basés sur l’EdU et de nombreuses autres applications, de la célèbre marque baseclick. Nous sommes ainsi en mesure de vous proposer un assortiment complet et nécessaire pour la chimie click.

Le chiffre à la fin du nom des kits indique la longueur d’onde à laquelle le colorant fluorescent peut être excité. Comme source d’excitation différents lasers peuvent être utilisés.

Les ClickTech EdU Cell Proliferation Kits pour la détection EdU de la prolifération cellulaire constituent une alternative réfléchie aux tests avec la BrdU, chronophages et moins sensibles. À l’instar des tests avec la BrdU, les tests nécessitent l’incorporation d’un dérivé d’uracile (dans le cas présent de la 2'-désoxy-5-éthynyluridine, abrégée en EdU) dans l’ADN se répliquant. Aucun anticorps n’est utilisé pour détecter les molécules d’EdU. Au lieu de cela, un colorant fluorescent est directement attaché grâce à une réaction click. Cette préparation rapide et élégante permet de marquer directement l’ADN répliqué avec le colorant fluorescent souhaité, et d’adapter ensuite parfaitement la détection à l’équipement du microscope ou à la situation de test (par ex. en cas de détections doubles ou triples). En outre la réaction étant extrêmement sélective, aucun marquage non spécifique ne se produit. Le protocole est composé d’un nombre limité d’étapes et réduit significativement le temps de travail global.

Des kits sont disponibles pour les applications suivantes :

▶ Kits pour la prolifération cellulaire: • Prolifération des cellules T (ClickTech EdU T Cell Proliferation Kit - Flow Cytometry) • Microscopie à fluorescence (ClickTech EdU Cell Proliferation Kit - Imaging) • Criblage à haut débit (ClickTech EdU Cell Proliferation Kit - HTS) • Cytométrie en flux (ClickTech EdU Cell Proliferation Kit - Flow Cytometry)▶ Kits pour la modification des acides nucléiques: • Modification de la PCR • DNA FISH Kit • Kit de marquage de l’ARN • ClickTech Oligo Link Kit • ClickTech Library Kit - full-length mRNA Seq

Fonctionnement de l’essai par chimie click :

Avantages de la méthode basée sur la chimie click :

• Extrêmement fiable
• Facilité d’utilisation
• Procédure de détection rapide (seulement 30 min.)
• Conditions douces, aucune dénaturation de l’ADN requise
• Système modulaire grâce à chimie click
• Compatible avec de nombreux colorants
• Compatible avec multiplexage

Les ClickTech EdU Cell Proliferation Kits pour criblage à haut débit permettent de mesurer les cellules adhérentes lors de la synthèse de l’ADN sur des plaques à 96 puits. À l’instar des tests avec la BrdU, les tests nécessitent l’incorporation d’un dérivé d’uracile (dans le cas présent de la 2'-désoxy-5-éthynyluridine, abrégée en EdU) dans l’ADN se répliquant. Aucun anticorps n’est utilisé pour détecter les molécules d’EdU. Au lieu de cela, un colorant fluorescent est directement attaché grâce à une réaction click. Cette préparation rapide et élégante permet de marquer directement l’ADN répliqué avec le colorant fluorescent souhaité, et d’adapter ensuite parfaitement la détection à l’équipement du microscope. En outre, la réaction est extrêmement sélective, ce qui signifie que pratiquement aucun marquage spécifique ne se produit. Le protocole est composé d’un nombre limité d’étapes et réduit significativement le temps de travail global.

Les ClickTech EdU Cell Proliferation Kits pour criblage à haut débit permettent de mesurer les cellules adhérentes lors de la synthèse de l’ADN sur des plaques à 96 puits. À l’instar des tests avec la BrdU, les tests nécessitent l’incorporation d’un dérivé d’uracile (dans le cas présent de la 2'-désoxy-5-éthynyluridine, abrégée en EdU) dans l’ADN se répliquant. Aucun anticorps n’est utilisé pour détecter les molécules d’EdU. Au lieu de cela, un colorant fluorescent est directement attaché grâce à une réaction click. Cette préparation rapide et élégante permet de marquer directement l’ADN répliqué avec le colorant fluorescent souhaité, et d’adapter ensuite parfaitement la détection à l’équipement du microscope. En outre, la réaction est extrêmement sélective, ce qui signifie que pratiquement aucun marquage spécifique ne se produit. Le protocole est composé d’un nombre limité d’étapes et réduit significativement le temps de travail global.