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X-β-Gal, 1 g
Masse moléculaire (M) 408,6 g/mol
Point de fusion 230 °C
Temp. de stockage : -20 °C
Temp. de transport: temp. ambiante
WGK 1
Nr. CAS 7240-90-6
EG-Nr. 230-640-8
Substrat colorimétrique de la β-galactosidase. Pour la biochimie et la biologie moléculaire
138,70 €/cdt.
TVA en sus. | 1 g par cdt.
Réf. 2315.3
Données du produit
X-β-Gal ≥99 %, BioScience Grade
Pour la mise en évidence colorimétrique de l’activité β-galactosidase, comme par ex. lors de la sélection blanc/bleu.
L’IPTG inhibe en tant que galactopyranoside le répresseur lac et entraîne par là même une induction du promoteur lac. Sur le plasmide est ensuite exprimée l’extrémité C-terminale, longue de près de 146 acides aminés, d’une β-galactosidase, qui complémente en tant qu’alpha-donneur la β-galactosidase délétée à extrémité C-terminale de la souche bactérienne. La β-galactosidase fonctionnelle scinde le galactoside X-Gal, générant une couleur bleue - ces clones lac+ sont bleu foncé.
Du fait que l’extrémité C-terminale de l’alpha-donneur est codée avant, et son extrémité N-terminale est codée après le site de clonage du plasmide, l’insertion d’un ADN étranger entraîne généralement un décalage de cadre de lecture ou tout au moins une forte élongation de la chaîne, de sorte qu’il ne peut y avoir aucun alpha-donneur fonctionnel, et donc aucune galactosidase fonctionnelle - les clones recombinants restent blancs. Des clones bleu clair apparaissent, soit parce que les insertions sont très courtes, soit parce que souvent l’extrémité C-terminale de l’alpha-donneur suffit pour une fonction rudimentaire, de sorte que dans les clones recombinants aussi, le X-Gal est scindé dans une faible mesure.
Concentration de travail : pour la sélection bleu/ blanc de clones recombinants sur plaques de gélose, utiliser env. env. 0,3 μl de solution mère par ml de milieu/agar.
Enzyme | β-D-Galactosidase |
Produit signal | Précipiter (sélection bleu/blanc) |
- Somme intermédiaire : 0.00
Réf. | Cdt. | Emb. | Prix | Quantité | |
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2315.1 | 100 mg | verre |
25,70 € |
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2315.2 | 500 mg | verre |
75,80 € |
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2315.3 | 1 g | verre |
138,70 € |
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2315.4 | 5 g | verre |
478,40 € |
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2315.5 | 2,5 g | verre |
263,40 € |
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Disponible
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Date de livraison inconnue à l'heure actuelle
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- Somme intermédiaire : 0.00
Téléchargements / FDS
Informations générales
Solutions mères (stable un an, si conservée à 4 °C) :
0,5 g de NBT dans 10 ml de diméthylformamide à 70 %.
0,5 g de BCIP-sel de p-toluidine dans 10 ml de diméthylformamide à 100 %.
Tampon d’incubation pour la phosphatase alcaline :
100 mM de NaCl, 5 mM de MgCl2, 100 mM de TRIS (pH 9,5).
Solution de substrat fraîche : 66 μl de solution mère NBT + 10 ml de tampon d’incubation, bien mélanger, ajouter 33 μl de solution mère BCIP. Utiliser en l’espace d’une heure.
Développement de blot : Env. 10 ml de solution de substrat par surface de membrane de 15 x 15 cm2. Développement à température ambiante, jusqu’à ce que les bandes deviennent visibles (30 min. environ).
Arrêt de réaction : rincer avec PBS/EDTA 20 mM.
Dissoudre 1 mg de TMB dans 0,1 ml de diméthylsulfoxyde (réf. 4720). Ajouter 9,9 ml d’une solution d’acétate de sodium 0,1 M (pH 6,0) (poudre : réf. 6779), filtrer et ajouter H2O2 (réf. 8070) (concentration finale 0,01 %).
Utiliser toujours des solutions de travail fraîchement préparées !
Incubation pendant 10 à 30 minutes à température ambiante (env. 50 μl par puits de microtitration ; ajouter ensuite 50 μl de H2SO4 1 M, réf. X873 par puits).
Quantification photométrique à 450 nm.
Référence bibliographique : Bos E.S. et al. (1981) J. Immunoassay 2, (3/4), 187.
Certificats d'analyse
Analyse garantie
Aspect | poudre blanche à blanc cassé |
Teneur (HPLC) | ≥99 % |
Rotation spécifique [α]20D (c=1 dans DMF/H2O 1:1) | -62° ±2° |
Eau (KF) | ≤0.2 % |
DNases, RNases, Protéases | non détectées |