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ROTI®Lumin, 2 x 120 ml

de  Carl ROTH
10x conc., sans fluorescence, pour les protéines et la cytoimmunochimie
Icon_Kuehltransport Les produits ainsi labellisés sont des produits particulièrement sensibles à la température et sont expédiés dans des boîtes isothermes spéciales avec éléments réfrigérants ou de la carboglace. Vous trouverez ici des informations sur nos frais d'expédition.
Cdt.
Emb.
Cdt.
Substrat HRP
Temp. de stockage : +4 °C
Temp. de transport: réfrigérée

2 x 120 ml sont suffisants pour env. 3 500 cm2 de membrane (env. 50 transferts de mini-gel) soit 2 400 puits dans l’ELISA.
Substrat de chimiluminescence pour les réactions de détection par la peroxydase

525,70 €/cdt. 

TVA en sus. | 1 kit par cdt.

Réf. P078.1

En production
Des frais de transport supplémentaires s'appliquent à cet article.
à partir de 6 cdt. 499,42 €/cdt.
à partir de 24 cdt. 473,13 €/cdt.

Données du produit


  • Sensible et fiable
  • Pour tous les types de membranes usuels
  • Faible bruit de fond
  • Évite la fastidieuse préparation d’un tampon peroxydase
  • Adapté aux strippings et hybridations répétitifs

ROTI®Lumin est un kit de chimiluminescence pour les molécules reporter couplées peroxydase (par ex. HRP-anticorps), telles qu’elles sont utilisées, entre autres, en Western blot. Par rapport aux substrats chromogènes, ROTI®Lumin présente une sensibilité accrue et réduit le bruit de fond.


Mécanisme

en présence de peroxyde d’hydrogène, ROTI®Lumin est converti par l’HRP en un dianion excité. Lors du retour du dianion à son état fondamental, il y a émission de lumière. L’émission lumineuse de ROTI®Lumin atteint le maximum en 5 minutes et reste à ce plateau maximal pendant env. 1 à 2 heures.



ROTI®Lumin 10x conc., sans fluorescence, pour les protéines et la cytoimmunochimie
Conseils d’utilisation

ROTI®Lumin est composé de deux solutions qui, avant utilisation, sont à mélanger dans un rapport 1:1. Il peut être utilisé sur membranes nitrocellulose, nylon et PVDF. Des résultats optimaux sont obtenus en combinaison avec Immobilon-P® PVDF ou ROTI®PVDF.
Les domaines d’utilisation typiques sont : Western blot, ELISA, Southern blot, Dot blotting et hybridations sur colonies. Les anticorps, qui adhèrent à la membrane, peuvent être facilement déplacés avec le tampon ROTI®Free Stripping, permettant ainsi une réutilisation de la membrane pour des réactions de mise en évidence.

RotiLumine_Sensitivitaet
Figure : Sensibilité de la ROTI®Lumine.
la sensibilité de ROTI®Lumin ultra se situe dans la partie basse du domaine du femtogramme. Mise en évidence d’un anticorps polyclonal (de g. à d. 4 pg, 400 fg, 40 fg, 4 fg) sur ROTI®PVDF (réf. T830.1). Mise en évidence dans le PBST moyennant un anticorps anti-lapin couplé HRP (1:2000).
a/A: ROTI®Lumin ultra ; b/B: ROTI®Lumin plus ; c/C: ROTI®Lumin ; d/D: produit concurrent pour le domaine du femtogramme. a/b/c/d : temps d’exposition 10 secondes, A/B/C/D : temps d’exposition de 1 minute.

Le kit contient

120 ml (25 ml) de ROTI®Lumin 1 (réf. P079) et de 120 ml (25 ml) de ROTI®Lumin 2 (réf. P080).
Les composants unitaires de ce kit ne peuvent pas être achetés séparément.



Informations techniques
Application Western, in situ, Histochimie 
Enzyme Peroxydase du raifort 
Mise en évidence chimioluminescent 
Produit signal Précipiter (Blot) 
Utilisation Western 
ROTI®Lumin
Quantité sélectionnée :   0
  1. Somme intermédiaire :  0.00
Réf. Cdt. Emb. Cdt. Prix Quantité
P078.1 1 kit plastique 2 x 120 ml

525,70 €

P078.2 1 kit plastique 2 x 25 ml

142,45 €

En stock
Disponible (tenir compte du délai de livraison)
En cours d’approvisionnement
Plus disponible
Date de livraison inconnue à l'heure actuelle
Quantité sélectionnée :   0
  1. Somme intermédiaire :  0.00

Téléchargements / FDS


Informations générales

Protocole d’essai pour l’utilisation du BCIP sel de p-toluidine/NBT lors des procédures dimmunotransfert :

Solutions mères (stable un an, si conservée à 4 °C) :
0,5 g de NBT dans 10 ml de diméthylformamide à 70 %.
0,5 g de BCIP-sel de p-toluidine dans 10 ml de diméthylformamide à 100 %.
Tampon d’incubation pour la phosphatase alcaline :
100 mM de NaCl, 5 mM de MgCl2, 100 mM de TRIS (pH 9,5).
Solution de substrat fraîche : 66 μl de solution mère NBT + 10 ml de tampon d’incubation, bien mélanger, ajouter 33 μl de solution mère BCIP. Utiliser en l’espace d’une heure.
Développement de blot : Env. 10 ml de solution de substrat par surface de membrane de 15 x 15 cm2. Développement à température ambiante, jusqu’à ce que les bandes deviennent visibles (30 min. environ).
Arrêt de réaction : rincer avec PBS/EDTA 20 mM.


Préparation pour la mise en évidence de l’activité de la peroxydase (immunodosage) :

Dissoudre 1 mg de TMB dans 0,1 ml de diméthylsulfoxyde (réf. 4720). Ajouter 9,9 ml d’une solution d’acétate de sodium 0,1 M (pH 6,0) (poudre : réf. 6779), filtrer et ajouter H2O2 (réf. 8070) (concentration finale 0,01 %).

Utiliser toujours des solutions de travail fraîchement préparées !

Incubation pendant 10 à 30 minutes à température ambiante (env. 50 μl par puits de microtitration ; ajouter ensuite 50 μl de H2SO4 1 M, réf. X873 par puits).
Quantification photométrique à 450 nm.

Référence bibliographique : Bos E.S. et al., 1981, J. Immunoassay 2, (3/4), 187.


Certificats d'analyse

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