product.details.print
ROTI®Lumin, 2 x 25 ml
Produits et réactifs prêts à l’emploi
2 x 120 ml sont suffisants pour env. 3 500 cm2 de membrane (env. 50 transferts de mini-gel) soit 2 400 puits dans l’ELISA.
134,40 €/cdt.
TVA en sus. | 1 kit par cdt.
Réf. P078.2
Alternative products
Convient à / Accessoires
Données du produit
- Sensible et fiable
- Pour tous les types de membranes usuels
- Faible bruit de fond
- Évite la fastidieuse préparation d’un tampon peroxydase
- Adapté aux strippings et hybridations répétitifs
ROTI®Lumin est un kit de chimiluminescence pour les molécules reporter couplées peroxydase (par ex. HRP-anticorps), telles qu’elles sont utilisées, entre autres, en Western blot. Par rapport aux substrats chromogènes, ROTI®Lumin présente une sensibilité accrue et réduit le bruit de fond.
en présence de peroxyde d’hydrogène, ROTI®Lumin est converti par l’HRP en un dianion excité. Lors du retour du dianion à son état fondamental, il y a émission de lumière. L’émission lumineuse de ROTI®Lumin atteint le maximum en 5 minutes et reste à ce plateau maximal pendant env. 1 à 2 heures.
ROTI®Lumin 10x conc., sans fluorescence, pour les protéines et la cytoimmunochimie
ROTI®Lumin est composé de deux solutions qui, avant utilisation, sont à mélanger dans un rapport 1:1. Il peut être utilisé sur membranes nitrocellulose, nylon et PVDF. Des résultats optimaux sont obtenus en combinaison avec Immobilon-P® PVDF ou ROTI®PVDF.
Les domaines d’utilisation typiques sont : Western blot, ELISA, Southern blot, Dot blotting et hybridations sur colonies. Les anticorps, qui adhèrent à la membrane, peuvent être facilement déplacés avec le tampon ROTI®Free Stripping, permettant ainsi une réutilisation de la membrane pour des réactions de mise en évidence.
la sensibilité de ROTI®Lumin ultra se situe dans la partie basse du domaine du femtogramme. Mise en évidence d’un anticorps polyclonal (de g. à d. 4 pg, 400 fg, 40 fg, 4 fg) sur ROTI®PVDF (réf. T830.1). Mise en évidence dans le PBST moyennant un anticorps anti-lapin couplé HRP (1:2000).
a/A: ROTI®Lumin ultra ; b/B: ROTI®Lumin plus ; c/C: ROTI®Lumin ; d/D: produit concurrent pour le domaine du femtogramme. a/b/c/d : temps d’exposition 10 secondes, A/B/C/D : temps d’exposition de 1 minute.
déroulement typique de la luminescence du groupe ROTI®Lumin: 0-30 min après mélange et vaporisation. Compétiteur P : produit concurrent pour le domaine du femtogramme.
120 ml (25 ml) de ROTI®Lumin 1 (réf. P079) et de 120 ml (25 ml) de ROTI®Lumin 2 (réf. P080).
Les composants unitaires de ce kit ne peuvent pas être achetés séparément.
sensibilité relative des ROTI®Lumins. Mesure de l’émission lumineuse relative après la réaction ECL moyennant HRP dissoute (50 fg).
Compétiteur P : produit concurrent pour le domaine du femtogramme.
déroulement typique de la luminescence du groupe ROTI®Lumin : 0-5 min. après mélange et vaporisation. Compétiteur P : produit concurrent pour le domaine du femtogramme.
| Application | Western, in situ, Histochimie |
| Enzyme | Peroxydase du raifort |
| Mise en évidence | chimioluminescent |
| Produit signal | Précipiter (Blot) |
| Utilisation | Western |
- Somme intermédiaire : 0.00
| Réf. | Cdt. | Emb. | Cdt. | Prix | Quantité | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| P078.1 | 1 kit | plastique | 2 x 120 ml |
504,20 € |
|
|
| P078.2 | 1 kit | plastique | 2 x 25 ml |
134,40 € |
|
|
|
En stock
Disponible
En cours d’approvisionnement
Plus disponible
Date de livraison inconnue à l'heure actuelle
|
||||||
- Somme intermédiaire : 0.00
Téléchargements / FDS
Informations générales
Solutions mères (stable un an, si conservée à 4 °C) :
0,5 g de NBT dans 10 ml de diméthylformamide à 70 %.
0,5 g de BCIP-sel de p-toluidine dans 10 ml de diméthylformamide à 100 %.
Tampon d’incubation pour la phosphatase alcaline :
100 mM de NaCl, 5 mM de MgCl2, 100 mM de TRIS (pH 9,5).
Solution de substrat fraîche : 66 μl de solution mère NBT + 10 ml de tampon d’incubation, bien mélanger, ajouter 33 μl de solution mère BCIP. Utiliser en l’espace d’une heure.
Développement de blot : Env. 10 ml de solution de substrat par surface de membrane de 15 x 15 cm2. Développement à température ambiante, jusqu’à ce que les bandes deviennent visibles (30 min. environ).
Arrêt de réaction : rincer avec PBS/EDTA 20 mM.
Dissoudre 1 mg de TMB dans 0,1 ml de diméthylsulfoxyde (réf. 4720). Ajouter 9,9 ml d’une solution d’acétate de sodium 0,1 M (pH 6,0) (poudre : réf. 6779), filtrer et ajouter H2O2 (réf. 8070) (concentration finale 0,01 %).
Utiliser toujours des solutions de travail fraîchement préparées !
Incubation pendant 10 à 30 minutes à température ambiante (env. 50 μl par puits de microtitration ; ajouter ensuite 50 μl de H2SO4 1 M, réf. X873 par puits).
Quantification photométrique à 450 nm.
Référence bibliographique : Bos E.S. et al. (1981) J. Immunoassay 2, (3/4), 187.